Готовая к применению твёрдая питательная среда HiMedia SMH144D-5X500ML Колумбийский агар (5×500 мл) поставляется в предварительно стерилизованных стеклянных флаконах. Среда предназначена для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических препаратах и контроля клостридий в нестерильной продукции; культивирование проводят в анаэробных условиях.

Назначение

Колумбийский агар рекомендован для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических препаратах при проведении испытаний на микробиологические пределы. Среда также применяется для проверки наличия Clostridium в нестерильных пищевых продуктах, диетических и пищевых добавках, а также в связанной с ними продукции.

Типы образцов:

• фармацевтические образцы;
• клинические образцы, включая образцы из ран.

При исследовании фармацевтических образцов необходимо использовать соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

При необходимости отрегулируйте pH так, чтобы после стерилизации он составлял 7,3 ± 0,2.

* pH также можно измерять после стерилизации при 25 °C.

** Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Панкреатический перевар казеина.

Мясной пептический перевар.

Панкреатический перевар сердца.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийский агар представляет собой универсальную питательную среду, разработанную Ellner и соавторами из Колумбийского университета и дополнительно обогащённую овечьей кровью. Среда также может использоваться для выделения микроорганизмов при добавлении различных компонентов.

Колумбийский агар готовят в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологические пределы, установленной USP/EP/BP/JP/IP. Среда предназначена для выявления клостридий в нестерильной продукции, включая пищевые продукты, диетические и пищевые добавки.

Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae класса Clostridia. Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, которые создают анаэробные условия и обеспечивают рост анаэробных микроорганизмов. Обогащённый образец затем пересевают на чашку с колумбийским агаром.

Колумбийский агар используют как основу для сред с кровью, а также для селективных сред, в состав которых в качестве добавок вводят различные комбинации антимикробных агентов.

Питательные свойства среды обусловлены следующими компонентами:

• триптон, экстракт HM и гидролизат HM обеспечивают питательные вещества;
• дрожжевой экстракт является источником углеродистых и азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов группы B и других необходимых питательных веществ для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Среду применяют для выявления клостридий в фармацевтических препаратах. Гентамицин FD252 подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и видов Staphylococcus. Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную реакцию на каталазу. Окончательное подтверждение проводят с помощью идентификационных тестов.

Методика подготовки и использования среды

Колумбийский агар представляет собой готовую к применению твёрдую среду во флаконе. Среда предварительно стерилизована и не требует дополнительной стерилизации.

1. Перед плавлением слегка ослабьте крышку флакона.
2. Расплавьте среду на предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
3. Дождитесь полного расплавления среды.
4. Разлейте расплавленную среду по пробиркам в виде столбиков или скошенной части либо по чашкам в требуемом объёме.
5. Оставьте среду до затвердевания.
6. При использовании чашки асептически штрихуйте, инокулируйте или распределите исследуемый посевной материал по поверхности среды.
7. Используйте посевную дозу 50–100 КОЕ.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: SMH144D-5X500ML
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: готовая к применению твёрдая питательная среда
• Упаковка: 5 × 500 мл
• Объём среды во флаконе: 500 мл
• Материал флакона: стекло
• Стерилизация: предварительно стерилизованная среда, дополнительная стерилизация перед применением не требуется
• Цвет среды: светло-янтарный
• Реакция среды: pH 7,10–7,50
• Условия культивирования при испытании на стимуляцию роста: анаэробные условия
• Температура инкубации при испытании на стимуляцию роста: 30–35 °C
• Продолжительность инкубации при испытании на стимуляцию роста: 24–48 ч
• Максимальный период инкубации для свойств, стимулирующих рост: ≤48 ч
• Посевная доза для испытания свойств, стимулирующих рост: ≤100 КОЕ
• Испытание на стерильность: соответствует критериям выпуска

Контроль качества

Внешний вид и физико-химические показатели

• Внешний вид: стерильный колумбийский кровяной агар в стеклянном флаконе.
• Цвет среды: светло-янтарный.
• Количество среды: 500 мл среды в стеклянном флаконе.
• Реакция: pH 7,10–7,50.
• Испытание на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Испытание на стимуляцию роста

Испытание на стимуляцию роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивают в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром казеина и сои (соево-казеиновом агаре).

Свойства, стимулирующие рост

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального периода, указанного для инкубации, при внесении ≤100 КОЕ в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.