Готовая стерильная питательная среда HiMedia SMH144-5X100ML Колумбийский агар (5×100 мл) производства HiMedia с объёмом 100 мл в стеклянном флаконе. Питательная среда предназначена для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических продуктах и клинических образцах; хранение после получения — при 15–25 °C.

Назначение

Колумбийский агар рекомендован для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических продуктах при микробиологическом испытании на микробиологическую чистоту по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Типы образцов:

• фармацевтические образцы;
• клинические образцы — материал из ран.

Состав

Состав среды:

При необходимости отрегулировать pH так, чтобы после стерилизации он составлял 7,3 ± 0,2.

pH также может быть измерен после стерилизации при 25 °C.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия заданным параметрам эффективности.

Расшифровка компонентов:

• Панкреатический перевар казеина.

• Пептический перевар мяса.

• Панкреатический перевар сердца.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийский агар представляет собой универсальную питательную среду, разработанную Эллнером и соавторами из Колумбийского университета и дополнительно обогащённую овечьей кровью. Среда также может применяться для выделения микроорганизмов при добавлении различных дополнительных компонентов.

Колумбийский агар приготовлен в соответствии с гармонизированной методикой испытания на микробиологическую чистоту USP/EP/BP/JP/IP. Среда рекомендована для проверки наличия Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и пищевые добавки и связанные с ними изделия. Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae класса Clostridia.

Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, создающие анаэробные условия и обеспечивающие рост анаэробных микроорганизмов. Обогащённый образец затем пересевают на чашку с колумбийским агаром.

Колумбийский агар в чашках используется как основа для сред, содержащих кровь, а также для селективных составов с различными комбинациями добавляемых противомикробных препаратов. Среда обладает высокой питательной ценностью благодаря триптону, экстракту HM и гидролизату HM. Дрожжевой экстракт обеспечивает поступление углеродистых и азотистых веществ, аминокислот с длинной цепью, витаминов группы B и других необходимых питательных веществ для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Среда применяется для выявления Clostridia в фармацевтических продуктах. Гентамицин (FD252) подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus.

Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную реакцию на каталазу. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Методика подготовки и применения

Колумбийский агар представляет собой готовую к применению плотную среду в стеклянном флаконе. Среда предварительно стерилизована и не требует дополнительной стерилизации.

1. Перед расплавлением слегка ослабьте крышку флакона.
2. Расплавьте среду на предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
3. После полного расплавления среды разлейте её в пробирки с формированием столбиков или скошенной поверхности либо в чашки в соответствии с назначением.
4. Оставьте среду до затвердевания.
5. При использовании чашек асептически нанесите исследуемый инокулят штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
6. Посевная доза составляет 50–100 КОЕ.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам (8,1,3,6,4).

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам (5,7).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар.
• Форма поставки: готовая к применению плотная питательная среда.
• Объём среды: 100 мл.
• Первичная упаковка: стеклянный флакон.
• Состояние при поставке: предварительно стерилизованная среда.
• Реакция среды после стерилизации: pH 7,3 ± 0,2.
• Контролируемая реакция среды: pH 7,10–7,50.
• Цвет среды: светло-янтарный.
• Условия хранения после получения: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная кровяная среда Columbia во флаконе из стекла.

Цвет среды

Среда светло-янтарного цвета.

Количество среды

100 мл среды в стеклянном флаконе.

Реакция среды

pH 7,10–7,50.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Испытание на ростовые свойства

Испытание ростовых свойств проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивают в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Коэффициент восстановления считают равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром казеина и сои, также называемом соево-казеиновым агаром.

Ростовые свойства считают соответствующими, если при заданной температуре рост микроорганизмов сопоставим с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды, за период, не превышающий минимальное установленное время, при внесении ≤100 КОЕ в анаэробных условиях при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

Культуральные характеристики

Условия наблюдения: анаэробная инкубация при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

После получения хранить при температуре 15–25 °C.

Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Перед открыванием контейнера прочитать этикетку.
• При работе использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдать надлежащие правила микробиологической лабораторной работы.
• При обращении с образцами соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Некоторые виды Clostridium могут демонстрировать слабый рост из-за различий в питательных потребностях.
2. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.