Готовая стерильная питательная среда HiMedia SMH118C-10X100ML Агар с маннитом и солью (10×100 мл) предназначена для селективного выделения патогенных стафилококков из фармацевтической продукции. Среда используется для микробиологических испытаний и контроля санитарно-бактериологических параметров; объём среды во флаконе составляет 100 мл, стерилизация перед применением не требуется.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения патогенных стафилококков из фармацевтических препаратов при проведении испытания на микробиологическую чистоту по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Тип среды: готовая к применению плотная среда во флаконе из стекла.

Состав

Состав, г/л:

Пептический перевар тканей животного происхождения

Панкреатический перевар казеина

Эквивалент мясного экстракта

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик среды.

Методика подготовки и применения

1. Среда предварительно стерилизована, поэтому дополнительная стерилизация не требуется.
2. Для расплавления поместите флакон с немного ослабленной крышкой в предварительно нагретую водяную баню или используйте другой подходящий способ.
3. После полного расплавления среды разлейте её по пробиркам для формирования столбиков или скошенных поверхностей либо по чашкам в зависимости от требуемого формата.
4. Оставьте среду до затвердевания.
5. При использовании чашек внесите исследуемый инокулят асептически одним из способов: штриховым посевом, внесением инокулята или поверхностным распределением.
6. Посевная доза: 50–100 КОЕ.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, кожных железах и слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является документированным условно-патогенным микроорганизмом человека. Способность вызывать свёртывание плазмы остаётся широко применяемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями.

Стафилококки обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Основание агара с маннитом и солью рекомендовано для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов. Среда также используется при проведении испытаний на микробиологическую чистоту для селективного выделения Staphylococcus. Формула соответствует гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Пептон HM B, триптон и пептон обеспечивают питательную ценность среды, являясь источниками углерода, азотсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов, других факторов роста и микроэлементов. Высокая концентрация хлорида натрия 7,5 % подавляет рост многих бактерий, не относящихся к стафилококкам. Маннитол является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, которое выявляется с помощью индикатора фенолового красного.

Staphylococcus aureus ферментирует маннитол, образуя жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы S.aureus обычно не ферментируют маннитол, поэтому формируют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S.aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирке или на предметном стекле. Липазную активность Staphylococcus aureus можно выявить добавлением эмульсии яичного желтка FD045; активность липазы проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Предположительный S.aureus должен быть подтверждён коагулазным тестом. Для исключения возможного влияния избытка соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования микроорганизм также следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избыток соли, например на питательный бульон M002.

Некоторые штаммы S.aureus могут проявлять замедленную ферментацию маннитола. Поэтому отрицательные результаты необходимо инкубировать повторно ещё 24 часа перед утилизацией образцов.

Образцы

Тип образцов:

• фармацевтические образцы;
• клинические образцы — образцы гноя.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открытием флакона прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является селективной; некоторые штаммы Staphylococcus aureus могут проявлять замедленную ферментацию маннитола.
2. Маннитол могут ферментировать и некоторые другие бактерии, не относящиеся к роду Staphylococcus, поэтому для идентификации необходимы дополнительные биохимические исследования.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с указаниями на этикетке и использовании до истечения срока годности при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный стеклянный флакон, содержащий слегка опалесцирующую среду с маннитом и солью.

Цвет

Среда красного цвета.

Количество среды

Количество среды во флаконе: 100 мл.

Тест на стимулирование роста

Тест на стимулирование роста выполнен в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BPJP/IP после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Степень восстановления принимается равной 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина.

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным для протестированной и одобренной партии среды, наблюдается при заданной температуре не более чем за минимальный установленный период времени при внесении ≤100 КОЕ: 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Индикаторные свойства

Колонии сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными для протестированной и одобренной партии среды, при заданной температуре в течение периода времени, указанного в диапазоне, при внесении ≤100 КОЕ: 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма отсутствует при заданной температуре в течение периода времени не менее максимального установленного значения при внесении ≥100 КОЕ: 30–35 °C в течение ≥72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены при указанных в