Питательная агаризованная среда HiMedia SMEB962-5X100ML Агар R2A (5×100 мл) — готовая к применению предварительно стерилизованная среда во флаконе. Применяется для количественного определения гетеротрофных микроорганизмов в очищенной питьевой воде при увеличенном времени инкубации, включая восстановление стрессированных и повреждённых клеток.

Назначение

Среда R-2A Agar рекомендована для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов в очищенной питьевой воде методом посева с увеличенным временем инкубации.

• Тип образца: пробы воды
• Назначение: агар
• Фасовка: 5 флаконов по 100 мл
• Объём среды во флаконе: 100 мл
• Форма поставки: готовая к применению твёрдая питательная среда во флаконе из стекла
• Предварительная стерилизация: выполнена; дополнительная стерилизация перед использованием не требуется

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Казитоза эквивалентна гидролизату казеина.

Принцип действия и интерпретация

Гетеротрофное планшетное счётное определение, ранее называвшееся стандартным планшетным подсчётом, применяется для оценки количества живых гетеротрофных бактерий в воде и контроля изменений в процессе водоподготовки, в распределительных системах или плавательных бассейнах.

Среда R-2A Agar рекомендована APHA для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов методами заливки, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Рецептура R-2A Agar сформулирована согласно Reasoner и Geldreich. Микроорганизмы, подвергшиеся стрессу или повреждению в процессе водоподготовки, не способны нормально расти на высокопитательных средах, поскольку быстрорастущие микроорганизмы подавляют их рост. Применение малопитательной среды R-2A Agar с увеличенным временем инкубации позволяет эффективно выявлять такие стрессированные микроорганизмы; соответствующий подход используется согласно EP и BP.

Многие бактерии из природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным уровнем питательных компонентов при температуре окружающей среды. Для таких микроорганизмов предпочтительны температуры ниже стандартных лабораторных 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• казитоза, протеозный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают источник азота, углеродистых соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ;
• декстроза (глюкоза) служит источником энергии;
• растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов за счёт поглощения токсичных побочных продуктов метаболизма;
• пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток;
• сульфат магния служит источником двухвалентных катионов и сульфата;
• двузамещённый фосфат калия используется для поддержания pH среды.

Результат подсчёта выражают в колониеобразующих единицах — КОЕ на объём исследованной пробы.

Методика подготовки и проведения анализа

Подготовка среды

1. Перед плавлением слегка ослабьте крышку флакона.
2. Расплавьте среду во флаконе на предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
3. После полного расплавления среды разлейте её по пробиркам для формирования столбиков или скошенной поверхности либо по чашкам в зависимости от выбранной методики.
4. Оставьте среду до затвердевания.

Посев

При использовании чашек внесите исследуемый инокулят асептически одним из способов:

• штриховой посев;
• внесение инокулята;
• поверхностное распределение по среде.

Посевная доза: 50–100 КОЕ.

Для количественного определения могут применяться:

• метод заливки;
• метод поверхностного посева;
• мембранно-фильтрационный метод.

Тип образца, сбор и обращение

Тип образца: пробы воды.

Сбор и обработку проб воды выполняйте с применением соответствующих методик и в соответствии с действующими руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения при получении: 15–30 °C
• Температура хранения: 15–30 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке
• Условие рабочих характеристик: применять в пределах установленного срока годности при хранении в рекомендованном температурном диапазоне

Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется увеличивать время инкубации до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для медленнорастущих микроорганизмов требуется увеличенное время инкубации по сравнению с указанным стандартным временем.
2. Среда предназначена для исследования проб воды и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов.
3. Для полной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильный стеклянный флакон со слегка опалесцирующей средой R-2A Agar.
• Цвет среды: светло-янтарный.
• Количество среды: 100 мл во флаконе из стекла.
• pH: 7,00–7,40.
• Контроль стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 35–37 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется дополнительная инкубация продолжительностью до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.