HiMedia SM972D-5X500ML Желчно-эскулиновый агар (5×500 мл)

Питательная агаризованная среда HiMedia SM972D-5X500ML Желчно-эскулиновый агар (5×500 мл) — готовая к применению стерильная твёрдая среда в стеклянной бутылке объёмом 500 мл. Среда предназначена для выделения и предположительной идентификации стрептококков группы D из пищевых и фармацевтических продуктов; положительная реакция определяется по почернению среды вследствие гидролиза эскулина.

Назначение

Желчно-эскулиновый агар рекомендуется для выделения и предположительной идентификации стрептококков группы D из пищевых и фармацевтических продуктов.

Тип образца: пищевые образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Эквивалент пептона HM B: мясной экстракт.

Эквивалент желчи: бычья желчь.

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преобладающими нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, визуализируемого в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

Желчно-эскулиновый агар первоначально был разработан для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда позволяет дифференцировать стрептококки группы D от стрептококков, не относящихся к группе D.

Желчно-эскулиновый агар также может использоваться для дифференциации родов Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина. Для идентификации энтерококков необходимо дополнительно выполнять другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Среда имеет высокую питательную ценность. Пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ для роста. Желчь ингибирует большинство сопутствующих бактерий. Эскулин гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который проявляется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

При разливе среды в пробирки в виде скошенной части положительная реакция определяется по почернению более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует либо в течение 24–48 ч почернело менее половины скошенной поверхности, реакция считается отрицательной.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительную реакцию в желчно-эскулиновом тесте.

Для усиления роста энтерококков желчно-эскулиновый агар может быть дополнен лошадиной сывороткой в концентрации 50 мл/л.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте исследуемый образец и инкубируйте его в бульоне Тодда—Хьюитта M313.
2. После 24 ч инкубации нанесите две капли культуры на поверхность скошенной среды или чашки со средой.
3. При использовании чашки выполните один из вариантов посева: штриховой посев, инокуляцию или поверхностное распределение посевного материала.
4. Для первичного посева используйте посевную дозу 50–100 КОЕ и соблюдайте условия асептики.
5. При использовании пробирки оцените почернение скошенной поверхности через 24–48 ч:
   • почернение более половины скошенной поверхности — положительная реакция;
   • отсутствие почернения или почернение менее половины скошенной поверхности — отрицательная реакция.

Приготовление и использование среды

Желчно-эскулиновый агар представляет собой готовую к применению твёрдую среду в стеклянной бутылке. Среда предварительно стерилизована и не требует дополнительной стерилизации.

1. Перед расплавлением слегка ослабьте крышку бутылки.
2. Расплавьте среду на предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
3. После полного расплавления среды разлейте её в пробирки в виде столбика или скошенной части либо в чашки в требуемом объёме.
4. Оставьте среду до полного застывания.
5. Выполните асептический штриховой посев, инокуляцию или поверхностное распределение исследуемого материала.

Тип и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Тип продукта: агаризованная питательная среда
• Назначение изделия: агар
• Форма поставки: готовая к применению среда
• Первичная упаковка: стеклянная бутылка
• Объём среды: 500 мл
• Цвет среды: янтарный
• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2
• Диапазон реакции в контроле качества: 6,40–6,80
• Стерильность: соответствует критериям выпуска
• Температура хранения после получения: 15–25 °C

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный желчно-эскулиновый агар в стеклянной бутылке.

Цвет среды

Среда янтарного цвета.

Количество среды

500 мл среды в стеклянной бутылке.

Реакция

pH: 6,40–6,80.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Для идентификации энтерококков одного желчно-эскулинового теста недостаточно; необходимо выполнять дополнительные исследования, включая тест на устойчивость к соли.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

После получения хранить при температуре 15–25 °C.

Использовать до даты окончания срока год