HiMedia SM972-5X100ML Желчно-эскулиновый агар (5×100 мл)

Готовая питательная среда HiMedia SM972-5X100ML Желчно-эскулиновый агар (5×100 мл) для изоляции и предварительной идентификации стрептококков группы D. Применяется при анализе пищевых и фармацевтических продуктов; содержит эскулин и цитрат железа для выявления способности микроорганизмов к гидролизу эскулина.

Принцип измерения

Среда основана на способности энтерококков и стрептококков группы D гидролизовать эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа, образуя коричнево-черный осадок, который визуализируется как темная зона вокруг колоний. Желчь в составе среды подавляет рост большинства сопутствующих бактерий.

Среда также может использоваться для дифференциации родов Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter, Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae на основании гидролиза эскулина.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

Желчно-эскулиновый агар поставляется в стеклянных флаконах в виде готовой стерильной среды.

1. Перед расплавлением слегка ослабьте зажим крышки.
2. Расплавьте среду на предварительно нагретой водяной бане или иным подходящим методом.
3. После полного расплавления разлейте среду в пробирки (в виде скоса или столбика) или в чашки Петри.
4. Дождитесь полного затвердевания.

Посев и инкубация

1. Асептически внесите исследуемый инокулят (50–100 КОЕ) методом штриха, инокуляции или поверхностного посева на чашку.
2. Инкубируйте образцы при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч в атмосфере с повышенным содержанием CO₂.
3. Для усиления роста энтерококков среду можно дополнить конской сывороткой (50 мл/л). В этом случае образец предварительно инокулируют в бульон Тодда-Хьюитта (M313), после 24 ч инкубации добавляют две капли культуры на поверхность скоса или чашки.

Интерпретация результатов

• Положительная реакция: образование темного коричневого или черного комплекса (зона черного осадка вокруг колоний). При посеве в пробирках со скосом положительным считается почернение более половины скоса в течение 24–48 ч.
• Отрицательная реакция: полное отсутствие почернения или почернение менее половины скоса в течение 24–48 ч.
• Особенности: стрептококки группы Viridians иногда дают слабую положительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus, Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат.

Технические характеристики

• Назначение: изоляция и идентификация стрептококков группы D
• Объем одного флакона: 100 мл
• Количество во флаконах: 5 шт.
• Цвет среды: янтарный
• Значение pH (при 25 °C): 6,6 ± 0,2 (диапазон 6,40–6,80)
• Условия хранения: 15–25 °C

Состав, г/л:

Контроль качества и эффективность

Культуральные характеристики наблюдаются в атмосфере с повышенным содержанием CO₂ после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для анализа пищевых и фармацевтических продуктов. Ограничения: является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) микроорганизмов. Для окончательной идентификации энтерококков рекомендуется проводить дополнительные тесты, например, на солеустойчивость.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.