HiMedia SM186C-5X100ML Нейтрализующий агар Дей-Энгли (5×100 мл)

Питательная агаровая среда HiMedia SM186C-5X100ML Нейтрализующий агар Дей-Энгли (5×100 мл) производства HiMedia — готовая к применению стерильная твёрдая среда объёмом 100 мл во флаконе. Среда применяется при испытаниях дезинфицирующих средств для нейтрализации химических веществ и определения их бактерицидного действия; рабочий диапазон pH составляет 7,6 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Нейтрализующий агар Дей-Энгли применяется при испытаниях дезинфицирующих средств, когда нейтрализация химического вещества необходима для определения его бактерицидной активности.

Типы исследуемых образцов:

• образцы объектов окружающей среды;
• косметическая продукция;
• фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Нейтрализующий агар Дей-Энгли разработан в соответствии с процедурой, описанной Engley и Dey.

Сильное бактериостатическое вещество подавляет рост и размножение бактерий, не уничтожая их. При благоприятных условиях такие бактерии сохраняют способность вызывать инфекцию.

Среда нейтрализует широкий спектр антисептиков и дезинфицирующих средств, включая:

• четвертичные аммониевые соединения;
• фенольные препараты;
• препараты йода и хлора;
• ртутные соединения;
• формальдегид;
• глутаровый альдегид.

Функции компонентов среды:

• триптон служит источником азота и углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• декстроза является источником энергии;
• дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B;
• бисульфит натрия нейтрализует альдегиды;
• тиогликолат натрия нейтрализует ртутные соединения;
• тиосульфат натрия нейтрализует йод и хлор;
• лецитин нейтрализует четвертичные аммониевые соединения;
• полисорбат 80 — неионогенное поверхностно-активное вещество — нейтрализует замещённые фенольные соединения;
• бромкрезоловый пурпуровый служит индикатором утилизации декстрозы.

Из-за высокой концентрации лецитина в бульонной среде мутность нельзя использовать для выявления роста. Поэтому в состав среды включены бромкрезоловый пурпуровый и декстроза. Микроорганизмы, ферментирующие декстрозу, изменяют цвет среды с пурпурного на жёлтый.

Для агаровой среды допускается избыточное заполнение, при котором образуется мениск или куполообразная поверхность. Такая поверхность может быть прижата к объекту для отбора образца и оценки его микробной обсеменённости. Чашки инкубируют с закрытыми крышками при подходящей температуре. Наличие микроорганизмов определяют по появлению колоний на поверхности агаровой среды.

Методика нейтрализации и определения бактерицидной активности

Нейтрализационный тест

Рост в нейтрализующем бульоне при отсутствии роста в основе нейтрализующего бульона указывает на нейтрализацию дезинфицирующего средства.

Для проверки бактерицидной активности содержимое обеих пробирок с бульоном пересевают на нейтрализующий агар Дей-Энгли:

• положительный рост из отрицательных пробирок с основой нейтрализующего бульона указывает на присутствие бактериостатического вещества;
• отсутствие роста указывает на бактерицидное дезинфицирующее средство;
• все положительные пробирки должны демонстрировать рост на нейтрализующем агаре Дей-Энгли.

Контрольные дезинфицирующие средства

В процедуре испытания используют следующие контрольные дезинфицирующие средства:

• 2 % хлор;
• 2 % формальдегид;
• 1 % глутаровый альдегид;
• 2 % йод;
• 2 % фенол;
• четвертичные аммониевые соединения в разведении 1/750;
• ртутные соединения в разведении 1/1000;
• другие контрольные средства.

Подготовка среды и порядок применения

Нейтрализующий агар Дей-Энгли представляет собой готовую к применению твёрдую среду во флаконе из стекла. Среда предварительно стерилизована и не требует дополнительной стерилизации.

1. Расплавьте среду во флаконе на предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
2. Перед расплавлением слегка ослабьте крышку флакона.
3. После полного расплавления среды разлейте её по пробиркам для формирования столбиков или скошенных участков либо в чашки в соответствии с задачей анализа.
4. Оставьте среду до затвердевания.
5. При использовании чашки асептически нанесите исследуемый инокулят штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
6. Используйте посевную дозу 50–100 КОЕ.
7. Инкубируйте чашки с закрытыми крышками при подходящей температуре.
8. Определяйте наличие микроорганизмов по появлению колоний на поверхности агаровой среды.

Сбор и обращение с образцами

Сбор образцов с участков до и после обработки дезинфицирующим средством позволяет оценивать процедуры очистки при санитарной обработке.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный нейтрализующий агар Дей-Энгли во флаконе из стекла.

Цвет среды

От пурпурного до красновато-пурпурного.

Объём среды

100 мл среды во флаконе из стекла.

pH

pH: 7,40–7,80.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Обозначения:

• (*) — соответствующие номера WDCM;
• (**) — ранее назывался Bacillus subtilis subsp. spizizenii;
• (#) — ранее назывался Aspergillus niger.

Технические характеристики

• Тип продукта: агаровая питательная среда
• Назначение изделия: агар
• Форма поставки: готовая к применению твёрдая среда
• Объём среды: 100 мл
• Количество во флаконе: 1 флакон
• Объём упаковки: 5×100 мл
• Материал флакона: стекло
• Предварительная стерилизация: есть
• Необходимость дополнительной стерилизации перед применением: отсутствует
• Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2
• pH по контролю качества: 7,40–7,80
• Цвет среды: от пурпурного до красновато-пурпурного
• Температура: 15–25 °C
• Температура хранения после получения: 15–30 °C
• Посевная доза для поверхностного посева: 50–100 КОЕ
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C
• Время инкубации при контроле культуральных характеристик: 40–48 ч
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска

Ограничения применения

1. Отдельные штаммы микроорганизмов могут иметь специфические требования к питательным веществам и физическим условиям. В зависимости от этого характер роста на среде может различаться, а у некоторых микроорганизмов может наблюдаться значительная задержка роста.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом требований пользователя.
3. Для полной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные серологические и биохимические исследования.
4. Из-за высокой концентрации лецитина в бульонной среде мутность не может использоваться как критерий выявления роста.
5. Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

При получении хранить при температуре 15–30