HiMedia SM173CCL-6X250ML Агар Мюллера-Хинтона (6×250 мл)

Питательная агаризованная среда HiMedia SM173CCL-6X250ML Агар Мюллера—Хинтона (6×250 мл) — готовая к применению стерильная среда с конечным pH 7,3 ± 0,1. Предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам, выделенных из клинических образцов, методом диффузии в агаре.

Назначение

Агар Мюллера—Хинтона предназначен для определения чувствительности чистых культур микроорганизмов к противомикробным препаратам, выделенных из клинических образцов, включая мочу, кал и кровь.

Среда применяется для диско-диффузионного определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Методика основана на диффузии противомикробных веществ, нанесённых на бумажные диски, через агаровый гель с последующим измерением зон задержки роста.

Состав

Состав на 1 л:

# Эквивалент настоя из сердца говядины.
## Эквивалент кислотного гидролизата казеина.
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Форма выпуска

• Форма: готовая к применению твёрдая питательная среда в стеклянном флаконе
• Объём одного флакона: 250 мл
• Количество в упаковке: 6 флаконов
• Общий объём упаковки: 1500 мл
• Стерильность: предварительно стерилизованная среда, дополнительная стерилизация перед применением не требуется
• Назначение изделия: агар

Принцип действия и интерпретация

Первоначально формула агара Мюллера—Хинтона была разработана как простая прозрачная агаровая среда для культивирования патогенных видов Neisseria. Впоследствии для культивирования патогенных видов Neisseria были разработаны другие среды, однако агар Мюллера—Хинтона получил широкое применение для определения устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфонамидам.

В настоящее время агар Мюллера—Хинтона используется в качестве тестовой среды для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам. Среда рекомендована для диффузии противомикробных препаратов, нанесённых на бумажные диски, через агаровый гель в соответствии с утверждёнными стандартами CLSI.

Среда выбрана CLSI по следующим причинам:

• обеспечивает хорошую воспроизводимость результатов тестирования чувствительности между сериями;
• содержит низкие концентрации ингибиторов сульфонамидов, триметоприма и тетрациклина;
• поддерживает рост большинства неприхотливых патогенных бактерий;
• для среды накоплены значительный объём данных и практический опыт оценки рабочих характеристик.

Kirby—Bauer рекомендовали эту среду для проведения тестов чувствительности к антибиотикам с использованием одного диска с высокой концентрацией препарата. Комитет ВОЗ по стандартизации тестирования чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов благодаря воспроизводимости результатов.

Агар Мюллера—Хинтона с 5 % бараньей кровью и агар Мюллера—Хинтона с гемоглобином рекомендованы для определения чувствительности Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae к противомикробным препаратам.

Настой HM B и ациказа обеспечивают среду азотистыми соединениями, углеродом, серой и другими необходимыми питательными веществами. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде. При гидролизе крахмала образуется декстроза, которая служит источником энергии.

Компоненты среды подобраны с низким содержанием тимина и тимидина; содержание оценивается по значениям минимальной ингибирующей концентрации для Enterococcus faecalis при использовании комбинации сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

Методика проведения диско-диффузионного теста

Метод Kirby—Bauer основан на диффузии в агаре противомикробных веществ, нанесённых на бумажные диски. Для метода используется диск с одной концентрацией противомикробного препарата; измеряемые диаметры зон задержки роста сопоставляют со значениями минимальной ингибирующей концентрации.

1. Подготовьте стандартизованную суспензию исследуемого микроорганизма.
2. Равномерно нанесите суспензию на всю поверхность питательной среды.
3. Разместите на поверхности среды бумажные диски, пропитанные определёнными количествами противомикробных препаратов.
4. Инкубируйте посевы.
5. Измерьте зоны задержки роста вокруг каждого диска.
6. Определите чувствительность микроорганизма сравнением полученных диаметров зон со стандартами CLSI.

На результаты диско-диффузионного тестирования влияют:

• глубина слоя агара;
• активность диска;
• концентрация посевного материала;
• pH среды;
• продукция β-лактамазы исследуемыми микроорганизмами.

Подготовка среды к применению

1. Среда в стеклянном флаконе поставляется готовой к применению и предварительно стерилизованной.
2. Перед плавлением слегка ослабьте крышку флакона.
3. Расплавьте среду в предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
4. Дождитесь полного расплавления среды.
5. Разлейте расплавленную среду в пробирки для формирования столбиков или скошенных поверхностей либо в чашки Петри — в зависимости от требуемого формата.
6. Оставьте среду до полного затвердевания.
7. При использовании чашки Петри асептически выполните штриховой посев, внесите посевной материал или распределите инокулят по поверхности.
8. Рекомендуемая посевная доза: 50–100 КОЕ.

Тип образца

Клинические образцы в виде чистых культур, выделенных из:

• мочи;
• кала;
• крови;
• других клинических материалов.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики и контроль качества

• Внешний вид: стерильный стеклянный флакон с немного опалесцирующим агаром Мюллера—Хинтона
• Цвет среды: светло-янтарный
• Количество среды: 250 мл во флаконе
• pH: 7,20–7,40
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска
• Условия хранения при получении: 15–30 °C
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия из каталожных данных: 15–25 °C

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Культуральные характеристики

Тесты чувствительности к антибиотикам выполняют в соответствии с действующей версией ISO/TS 16782; результаты должны соответствовать установленным пределам приемки. Рабочие характеристики среды проверяют в соответствии с руководствами CLSI и EUCAST.