Трехсахарный железный агар HiMedia SM021-5X100ML (5×100 мл) предназначен для идентификации грамотрицательных энтеробактерий на основе ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также продукции сероводорода. Среда поставляется в виде готового стерильного агара в стеклянных флаконах объёмом 100 мл.

Область применения

Среда рекомендуется для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл. Соответствует рекомендациям APHA по анализу мясных, пищевых, молочных продуктов, а также используется в тестах на микробиологическую чистоту для подтверждения присутствия Salmonellae и идентификации грамотрицательных бацилл.

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железный агар (TSI) позволяет дифференцировать микроорганизмы по их способности расщеплять углеводы и вырабатывать H₂S.

Механизм реакции

• Питательные компоненты: Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и HM-пептон B обеспечивают азотистые соединения, серу, микроэлементы и витамины группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Углеводы: Лактоза, сахароза и декстроза (глюкоза) выступают в роли ферментируемых углеводов.
• Индикаторы: Феноловый красный служит pH-индикатором. Система из тиосульфата натрия и ионов железа служит индикатором продукции H₂S.

Интерпретация результатов

Бактерии, ферментирующие глюкозу, вырабатывают кислоты, что меняет цвет среды с красного на жёлтый. В столбике (анаэробная зона) вырабатывается больше кислоты, чем в скосе (аэробная зона). Если бактерия ферментирует только глюкозу, в скосе происходит окислительное декарбоксилирование пептона с образованием щелочных продуктов, которые нейтрализуют кислоту, в результате чего скос остаётся красным (щелочным), а столбик становится жёлтым (кислым). Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу, вырабатывают достаточное количество кислоты, чтобы и скос, и столбик стали жёлтыми.

• Щелочной скос / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислый скос / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, или глюкоза и лактоза, или все три сахара.
• Пузырьки или трещины в среде: продукция газа (CO₂).
• Чёрный осадок: продукция сероводорода (H₂S), который вступает в реакцию с солями железа с образованием нерастворимого сульфида железа.

Для дифференциации видов Salmonella и Proteus рекомендуется использовать TSI-агар параллельно с мочевинным агаром или бульоном (M112/M111).

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Эквивалентно мясному экстракту.

Методика использования

Среда поставляется в виде готового стерильного агара в стеклянных флаконах и не требует дополнительной стерилизации.

1. Перед плавлением слегка ослабьте крышку флакона.
2. Расплавьте среду с помощью предварительно нагретой водяной бани или иным подходящим методом.
3. После полного расплавления разлейте среду в пробирки (для создания скоса и столбика) или в чашки Петри.
4. Дайте среде застыть.
5. В случае использования чашек Петри, асептически проведите посев, инокуляцию или поверхностный размаз тестового инокулята (50–100 КОЕ).

Культуральные свойства

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения и предостережения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и H₂S-продуцирующие Salmonella могут не давать положительной реакции на H₂S на TSI-агаре. Это может происходить из-за того, что утилизация сахарозы в данной среде подавляет ферментативный путь, приводящий к продукции H₂S.

Хранение: При получении хранить при температуре 15–25 °C. Утилизация: Использованные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.