HiMedia SM016C-10X100ML Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым (10×100 мл)

Готовая селективная питательная среда HiMedia SM016C-10X100ML Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым (10×100 мл) для выделения сальмонелл, за исключением Salmonella Typhi, из фекалий, пищевых продуктов и молочных образцов. Питательная среда применяется для первичного посева клинических, пищевых, водных и фармацевтических образцов; высокая селективность может подавлять рост Salmonella Typhi и видов Shigella, поэтому рекомендуется параллельное использование менее ингибирующей среды.

Назначение

Модифицированный агар с бриллиантовым зелёным предназначен для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из следующих образцов:

• клинические образцы: фекалии;
• пищевые продукты и молочные образцы;
• образцы воды;
• фармацевтические образцы.

Клинические образцы можно непосредственно высевать на эту среду. Для повышения вероятности выделения сальмонелл рекомендуется использовать агар одновременно с менее ингибирующей питательной средой. Культуры, предварительно обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне, часто высевают на модифицированный агар с бриллиантовым зелёным одновременно с висмут-сульфитным агаром, агаром SS и агаром МакКонки.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика подготовки и посева

1. Используйте готовую к применению твёрдую питательную среду во флаконе из стекла.
2. Не стерилизуйте среду: среда предварительно стерилизована.
3. Перед плавлением слегка ослабьте крышку флакона.
4. Расплавьте среду в предварительно нагретой водяной бане или другим подходящим способом.
5. После полного расплавления среды разлейте её в пробирки для формирования столбиков или скошенных поверхностей либо в чашки Петри — в зависимости от требуемого формата.
6. Оставьте среду до затвердевания.
7. При работе с чашкой Петри асептически нанесите исследуемый посевной материал штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
8. Используйте посевную дозу 50–100 КОЕ.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированная основа агара с бриллиантовым зелёным применяется как первичная среда для выделения видов Salmonella. Среда содержит бриллиантовый зелёный, подавляющий рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. Рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus в основном подавляется.

Протеозопептон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов, аминокислот и других необходимых питательных веществ. Лактоза и сахароза являются источниками энергии. Ферментация лактозы и/или сахарозы приводит к образованию кислой среды, изменение которой регистрируется индикатором феноловым красным. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Бриллиантовый зелёный подавляет сопутствующую микрофлору.

При подозрении на высокое содержание конкурирующих микроорганизмов вместе с видами Salmonella в среду можно дополнительно внести сульфацетамид в концентрации 1 г/л и манделат натрия в концентрации 0,25 г/л.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют колонии от белого до розовато-красного цвета в течение 18–24 ч инкубации.

Различные виды Salmonella вызывают инфекции от лёгкого самоограничивающегося гастроэнтерита до угрожающей жизни брюшнотифозной инфекции. Наиболее распространённая форма сальмонеллёза — самоограничивающийся гастроэнтерит с лихорадкой продолжительностью менее 2 суток и диареей продолжительностью менее 7 суток.

Среда с бриллиантовым зелёным как первичная среда для выделения видов Salmonella впервые была описана Kristensen и др., а затем модифицирована Kauffmann. Среда также описана в Европейской фармакопее (EP), Британской фармакопее (BP) и Индийской фармакопее (IP), а также рекомендована методическими документами APHA и FDA.

Типы образцов

• Фекалии.
• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Образцы воды.
• Фармацевтические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Несмотря на селективность в отношении Salmonella, на среде могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
3. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
4. Предположительно выделенные изоляты Salmonella требуют дополнительного подтверждения.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики

• Внешний вид: стерильный стеклянный флакон со слегка опалесцирующим модифицированным агаром с бриллиантовым зелёным.
• Цвет среды: зеленовато-коричневый.
• Количество среды: 100 мл во флаконе из стекла.
• pH: 6,70–7,10.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после расплавления среды и разливки в стерильные чашки Петри. Чашки инокулируют указанными тестовыми микроорганизмами и инкубируют при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре. В обозначениях штаммов в скобках приведены соответствующие номера WDCM.