HiMedia MV994-500G Основа Campylobacter HiVeg агара

Питательная среда HiMedia MV994-500G Основа Campylobacter HiVeg агара — порошкообразная основа без компонентов животного происхождения для приготовления селективной среды. Предназначена для селективного выделения видов Campylobacter из пищевых, молочных и экологических образцов; отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в питательных потребностях.

Назначение

Основа рекомендована для приготовления селективной среды при выделении видов Campylobacter из пищевых продуктов, молочных и экологических образцов, а также других материалов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Температура хранения невскрытого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 19,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (121 °C) в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов крови:
   • 5–7 % об./об. стерильной гемолизированной крови лошади;
   • 10 % стерильной дефибринированной крови овцы.
6. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Блазера—Ванга FD006 или селективной добавки Скирроу FD008.
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Виды Campylobacter широко распространены в окружающей среде и обитают в различных экологических нишах. Инфекция, вызванная видами Campylobacter, относится к наиболее распространённым причинам бактериального гастроэнтерита у человека. Большинство видов обнаруживается у животных, включая крупный рогатый скот и свиней, и может вызывать бесплодие и аборты.

C. jejuni первоначально выделяли на кровяной среде с антибиотиками. Среда Скирроу для видов Campylobacter представляла собой основу кровяного агара № 2 с добавлением крови лошади и антибиотиков. Позднее Блазер и соавторы выделяли C. jejuni на агаре Бруцелла с добавлением крови овцы и четырёх антибиотиков. Для повышения селективности среды за счёт ингибирования сопутствующей кишечной микрофлоры позднее был добавлен пятый антибиотик — цефалотин.

Основа агара Campylobacter рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения видов Campylobacter. Основа агара Campylobacter HiVeg®™ изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Среда обогащена компонентами, поддерживающими обильный рост видов Campylobacter. Осмотическое равновесие среды поддерживается хлоридом натрия. Кровь служит дополнительным источником питательных веществ, включая фактор X. Селективные антибиотические добавки Блазера—Ванга FD006 и Скирроу FD008 существенно подавляют рост нормальной кишечной микрофлоры и одновременно способствуют росту и выделению C. jejuni из фекальных образцов. Амфотерицин B в составе добавки Блазера—Ванга в значительной степени или полностью ингибирует рост грибов.

Колонии C. jejuni могут иметь следующие признаки:

• негемолитические, плоские, серые колонии с неровным краем;
• приподнятые округлые колонии со слизистым видом;
• у некоторых штаммов — желтовато-коричневая или слегка розовая окраска;
• на влажной поверхности возможно роение.

Инкубация при 35–37 °C может приводить к замедленному росту культур C. jejuni. Инкубация чашек при 42 °C ускоряет рост.

Обогащение и высев образцов

1. Загрязнённый образец пищевого продукта массой 10–25 г внесите в основу обогатительного бульона для Campylobacter M899 с добавкой FD042.
2. Инкубируйте бульон при перемешивании в микроаэробной атмосфере в течение 16–18 ч.
3. Пересевайте обогатительную культуру на селективную среду — агар Campylobacter MV994.

Образцы

• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы окружающей среды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно установленным методикам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно пересыпающийся порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный гель жёлтого цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. гемолизированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель красно-коричневого цвета.

Реакция

Реакция 3,95%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают в атмосфере с пониженным содержанием кислорода после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Используют селективную добавку Блазера—Ванга FD006 или селективную добавку Скирроу FD008.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Порошок обладает гигроскопичностью; попадание влаги может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте упаковку. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры при утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие

Основа HiVeg®™ использует пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения и предназначена для приготовления среды с добавками крови лошади или овцы и селективными добавками FD006 либо FD008.

Совместимые компоненты

• Основа обогатительного бульона для Campylobacter M899.
• Добавка FD042 к обогатительному бульону.
• Селективная добавка Блазера—Ванга FD006.
• Селективная добавка Скирроу FD008.
• Стерильная гемолизированная кровь лошади: 5–7 % об./об.
• Стерильная дефибринированная кровь овцы: 10 %.