Основа колумбийского кровяного агара HiMedia М144-500G (сухой, уп. 500гр.)

Сухая питательная среда Основа колумбийского кровяного агара HiMedia M144-500G (уп. 500 г) предназначена для приготовления кровяных, шоколадных, а также различных селективных и дифференциальных сред. Применяется для изоляции микроорганизмов из клинических и неклинических образцов; содержит специальный пептон для обеспечения быстрого и обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов.

Принцип измерения

Среда разработана для обеспечения типичной колониальной морфологии, усиления выработки пигмента и получения более четких гемолитических реакций. Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты. Добавление овечьей крови позволяет определять гемолиз и обеспечивает гемовый фактор (X-фактор), необходимый для роста многих бактерий.

Среда не содержит V-фактора (никотинамидадениндинуклеотида), поэтому Haemophilus influenzae, требующий обоих факторов (X и V), на данной основе не растет. При добавлении стерильной сыворотки среда эффективно используется для теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae (линии преципитации токсина-антитоксина становятся видимыми через 48 часов).

Область применения

Используется для анализа клинических образцов: мазков из зева, гнойных выделений. Для многих патогенов требуется инкубация в атмосфере с содержанием CO₂ около 3–10 %.

Особенности культивирования

• Brucella: высокая инфекционность, инкубация в 5–10 % CO₂.
• Campylobacter: оптимальный рост при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Gardnerella: инкубация при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере 7 % CO₂.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Приготовление производных сред

• Кровяной агар: к стерильной охлажденной основе добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы.
• Шоколадный агар: к стерильной охлажденной основе добавить 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы. Нагревать при 80 °C в течение 10 минут при постоянном перемешивании.
• Селективные среды: в стерильную основу добавляются антимикробные агенты.

Варианты селективного обогащения (на 500 мл стерильной расплавленной основы)

• Для Brucella spp.: 1 флакон селективной добавки NPBCVN (FD005).
• Для Campylobacter spp.: 1 флакон селективной добавки (Blaser-Wang FD006, Butzler FD007, Skirrow FD008, VTCA FD090 или Butzler VI FD106) совместно с 1 флаконом ростовой добавки Minerals Growth Supplement (FD009) и 5–7 % (об/об) крови лошади или овцы.
• Для Gardnerella spp.: 1 флакон селективной добавки GNA (FD056).
• Для кокков: 1 флакон селективной добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119).

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Физико-химические показатели

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность базовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Цвет после добавления 5 % крови: вишнево-красный непрозрачный гель.

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Результаты получены при добавлении 5 % (м/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения применения

1. Некоторые требовательные организмы, такие как Haemophilus influenzae, могут не расти без дополнительного обогащения кровью.
2. Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут проявлять зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз.
3. Для окончательной идентификации требуется биохимическая характеристика колоний чистой культуры.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать крышку во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Комплект поставки и совместимость

Среда соответствует ГОСТ Р 51921-2002, сертификат ФСЗ 2009/03707.

Дополнительные компоненты (поставляются по заявке):

• FD006 Добавка для кампилобактерий- I (Blaser-Wang)
• FD165 Добавка для кампилобактерий- II (Butzler)
• FD008 Добавка для кампилобактерий-III (Skirrow)
• FD009 Ростовая добавка для кампилобактерий
• FD090 Селективная добавка для кампилобактерий
• FD106 Добавка для кампилобактерий-VI