Основа колумбийского кровяного агара HiMedia М144-500G (сухой, уп. 500гр.)

Сухая питательная среда «Основа колумбийского кровяного агара HiMedia М144-500G (сухой, уп. 500гр.)» производства HiMedia с дозировкой 44,0 г/л и конечным pH 7,3 ± 0,2. Основа предназначена для приготовления кровяного и шоколадного агаров, селективных и идентификационных сред, а также выделения микроорганизмов из клинических и не клинических образцов.

Назначение

Основа колумбийского кровяного агара применяется для приготовления кровяного агара, шоколадного агара, различных селективных и идентификационных питательных сред, а также для выделения микроорганизмов из клинических и не клинических образцов.

Изделие предназначено для профессионального применения in vitro. Категория среды: специальная. Назначение изделия: основа. Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03707. В оригинальном описании каталога указано соответствие ГОСТ Р 51921-2002.

Состав

Дозировка компонентов приведена в расчёте на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите стерильную основу до 45–50 °C перед внесением термочувствительных компонентов.

Приготовление кровяного агара

Добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы к стерильной охлаждённой основе.

Приготовление шоколадного агара

Добавьте 10 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы к стерильной охлаждённой основе. Нагревайте смесь до 80 °C в течение 10 мин при постоянном перемешивании.

Приготовление селективных сред

Среду можно сделать селективной добавлением различных противомикробных препаратов к стерильной основе.

Среды для Brucella

Добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Среды для Campylobacter

К 500 мл стерильной расплавленной основы добавьте:

• регидратированное содержимое 1 флакона одной из селективных добавок: Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106);
• регидратированное содержимое 1 флакона ростовой минеральной добавки (FD009);
• 5–7 % об./об. крови лошади или овцы.

Среды для Gardnerella

Добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки GNA (FD056) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Среды для кокков

Добавьте регидратированное содержимое 1 флакона одной из селективных добавок: NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Принцип действия и интерпретация

Основа колумбийского кровяного агара разработана Ellner и соавторами. Специальный пептон поддерживает быстрый и обильный рост требовательных и нетребовательных микроорганизмов. Среда способствует формированию типичной морфологии колоний, улучшает образование пигмента и обеспечивает более чёткую дифференциацию гемолитических реакций.

Fildes установил, что питательный агар с добавлением переваренной крови овцы содержит оба фактора, необходимые для роста Haemophilus influenzae. Добавление бацитрацина делает обогащённую колумбийскую агаровую среду селективной для выделения видов Haemophilus из клинических образцов, особенно из образцов верхних дыхательных путей.

Основа колумбийского агара используется как базовая среда для составов с добавлением крови, а также для селективных сред, в которых применяются различные комбинации противомикробных препаратов.

Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты. Кровь овцы позволяет выявлять гемолиз и служит источником гема, или фактора X, необходимого для роста многих бактерий. При этом кровь овцы не содержит фактор V — никотинамидадениндинуклеотид, поэтому Haemophilus influenzae, которому требуются одновременно факторы X и V, на этой среде не растёт.

Основа колумбийского агара с добавлением стерильной сыворотки образует эффективную среду для тестирования вирулентности Corynebacterium diphtheriae. После выполнения установленной методики для C. diphtheriae линии преципитации токсин–антитоксин становятся отчётливо видимыми через 48 ч.

Многие патогенные микроорганизмы требуют углекислого газа, поэтому чашки можно инкубировать в атмосфере, содержащей приблизительно 3–10 % CO₂.

Типы образцов

Клинические образцы:

• мазки из горла;
• гной.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия культивирования и ограничения

• Культуры Brucella высокоинфекционны и требуют осторожного обращения; инкубируйте их в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
• Виды Campylobacter лучше всего растут при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Чашки со средой, содержащей добавки для Gardnerella, следует инкубировать при 35 °C в течение 48 ч в атмосфере с содержанием 7 % CO₂.
• Для полного видового определения требуется биохимическая характеристика колоний чистой культуры.
• Некоторые требовательные микроорганизмы, например Haemophilus influenzae, могут не расти на среде; может потребоваться добавление крови.
• Из-за относительно высокого содержания углеводов β-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз.

Требования безопасности

• Только для диагностического применения in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5 % м/об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,4 % м/об. при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены после добавления 5 % м/об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики