HiMedia MV971-500G Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым
Питательная среда HiMedia MV971-500G Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым предназначена для селективного выделения и идентификации сальмонелл из смешанной микрофлоры. Применяется при анализе пищевых, молочных и водных проб, подавляя рост Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas, однако другие представители Enterobacteriaceae также могут расти.
Описание
Питательная среда HiMedia MV971-500G Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым предназначена для селективного выделения и идентификации сальмонелл из смешанной микрофлоры. Применяется при анализе пищевых, молочных и водных проб, подавляя рост Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas, однако другие представители Enterobacteriaceae также могут расти.
Назначение
Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым предназначена для селективного выделения и идентификации сальмонелл из смешанной микрофлоры с ингибированием Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas.
Типы исследуемых образцов:
- пищевые продукты;
- молочные продукты;
- вода.
Состав
Концентрации указаны в г/л.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон HiVeg® | 10,000 |
| Экстракт HiVeg® | 5,000 |
| Дрожжевой экстракт | 3,000 |
| Лактоза | 10,000 |
| Сахароза | 10,000 |
| Динатрий гидрофосфат | 1,000 |
| Натрий дигидрофосфат | 0,600 |
| Феноловый красный | 0,090 |
| Бриллиантовый зелёный | 0,0047 |
| Агар | 12,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 6,9 ± 0,2 |
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
Принцип действия и интерпретация
Сальмонеллы вызывают различные инфекции — от лёгкого самоограничивающегося гастроэнтерита до опасной для жизни брюшнотифозной лихорадки. Наиболее распространённая форма сальмонеллёза — самоограничивающийся гастроэнтерит с лихорадкой продолжительностью менее 2 дней и диареей продолжительностью менее 7 дней.
Основа агара с бриллиантовым зелёным и фосфатами сформулирована согласно рекомендациям Национального института общественного здравоохранения в Утрехте. Среда также рекомендована комитетом ISO для выделения сальмонелл из мяса и мясных продуктов, а также молока и молочных продуктов.
Пептон HiVeg®, экстракт HiVeg® и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов, аминокислот и других необходимых питательных веществ. Лактоза и сахароза являются источниками энергии. Ферментация лактозы и/или сахарозы приводит к снижению pH среды, которое выявляется по изменению окраски индикатора фенолового красного. Фосфаты буферируют среду. Бриллиантовый зелёный подавляет сопутствующую микрофлору.
В среде животный пептон полностью заменён растительными пептонами HiVeg®; это исключает использование животного сырья в составе пептонной основы и связанные с ним риски BSE/TSE.
При подозрении на большое количество конкурирующих микроорганизмов среду можно дополнительно обогащать:
- сульфацетамидом — 1 г/л;
- манделатом натрия — 0,25 г/л.
Из-за высокой селективности агар с бриллиантовым зелёным и фосфатами рекомендуется использовать совместно со средой с меньшим ингибирующим действием для повышения вероятности восстановления сальмонелл.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 25,84 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагревайте суспензию при периодическом перемешивании.
- Доведите среду только до кипения, чтобы полностью растворить компоненты.
- Не автоклавируйте среду.
- Для повышения селективности и максимального восстановления культур асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки S Selective Supplement (FD068).
- Тщательно перемешайте среду.
- Разлейте подготовленную среду в стерильные чашки Петри.
Обогащение и выделение культур
Часто культуры предварительно обогащают в следующих средах:
- бульон Selenite Cystine HiVeg® (MV025);
- основа бульона Tetrathionate HiVeg® без йода и бриллиантового зелёного (MV032).
После обогащения культуры одновременно высевают на следующие среды:
- модифицированный агар Brilliant Green HiVeg® Base (MV016/MV971);
- агар SS HiVeg® (MV108);
- агар Bismuth Sulphite HiVeg® (MV027);
- агар MacConkey HiVeg® (MV081).
Сбор и обращение с образцами
Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Ограничения применения
- Несмотря на селективность среды в отношении сальмонелл, на среде могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
- Предположительно выделенные культуры сальмонелл необходимо дополнительно подтверждать.
Контроль качества
Внешний вид
Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.
Желирование
Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется гель зеленовато-коричневого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
Реакция
Реакция водного раствора с концентрацией 5,2 % масс./об. при 25 °C:
- pH: 6,9 ± 0,2.
Диапазон pH
pH: 6,70–7,10.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии |
|---|---|---|---|---|
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | ≥10⁴ | ингибирован | 0 % | |
| ^Proteus hauseri ATCC 13315 | 50–100 | от отсутствующего до слабого | ≤10 % | красный |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 (00024*) | 50–100 | от отсутствующего до слабого | ≤10 % | красный |
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | ярко-красный |
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | ярко-красный |
* Соответствующие номера WDCM.
^ Ранее вид назывался Proteus vulgaris.
Технические характеристики
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Происхождение | Без компонентов животного происхождения, растительная основа |
| Тип продукта | HiVeg™ |
| Физическая форма | Порошок |
| Тип упаковки | Флакон из полиэтилена высокой плотности (HDPE) |
| Назначение изделия | Основа |
| Масса | 500 г |
| Температура хранения сухого продукта | 10–30 °C |
| Температура хранения приготовленной среды | 2–8 °C |
Условия хранения и срок годности
Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом виде, поскольку гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование продукта.
Храните препарат в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.
Требования безопасности
Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте:
- защитные перчатки;
- защитную одежду;
- средства защиты глаз;
- средства защиты лица.
При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами. Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Утилизация
Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.
Инфекционные материалы и материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.
Нормативные основания методики
Состав и применение среды основаны на рекомендациях Национального института общественного здравоохранения в Утрехте и методах ISO для анализа мяса и мясных продуктов, микробиологических исследований, а также молока и молочных продуктов.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
