HiMedia MV926-500G Дифференциальный HiVeg агар Редди

Питательная агаризованная среда HiMedia MV926-500G Дифференциальный HiVeg агар Редди с растительными пептонами предназначена для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков. Среда применяется при анализе пищевых образцов, а дифференциация основана на ферментации лактозы, гидролизе аргинина и утилизации цитрата кальция.

Назначение

Среда рекомендована для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков. Тип образца: пищевые продукты.

Среда предназначена для дифференциального подсчёта молочнокислых стрептококков. Лактозоферментирующие микроорганизмы образуют кислоту и жёлтые колонии; различия между культурами дополнительно оценивают по изменению окраски колоний и образованию прозрачных зон вследствие утилизации цитрата.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Наиболее распространённые микроорганизмы, используемые в молочной промышленности в качестве заквасочных культур, относятся к молочнокислым стрептококкам. К этой группе относятся Lactococcus lactis и его подвиды cremoris и diacetylactis.

Дифференциацию проводят по биохимическим признакам. Основными критериями являются гидролиз аргинина, а также образование диацетила и ацетоина.

Дифференциальный агар Редди, модифицированный, также называемый молочнокислым агаром для штрихового посева, рекомендован для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков. Среда была первоначально описана Reddy и соавторами, а затем модифицирована Mullan и Walker. Среда также рекомендована APHA для дифференциального количественного определения молочнокислых стрептококков.

Лактозоферментирующие микроорганизмы образуют кислоту и жёлтые колонии. Lactococcus lactis первоначально образует кислоту, но позднее приобретает фиолетово-пурпурную окраску из-за выделения аммиака при расщеплении аргинина. Lactococcus lactis subsp. diacetylactis образует более интенсивную пурпурную окраску по сравнению с Lactococcus lactis.

Lactococcus lactis subsp. diacetylactis использует взвешенный цитрат кальция; колонии, разрушающие цитрат, образуют прозрачные зоны на мутном фоне.

В среде HiVeg® агар для молочнокислого штрихового посева пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами. Это исключает риски, связанные с BSE/TSE и применением пептонов животного происхождения.

Функции компонентов:

• Пептон HiVeg®, соевый пептон, дрожжевой экстракт и экстракт HiVeg®: источники необходимых питательных веществ, включая углерод, азот, аминокислоты и витамины.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• L-аргинин и цитрат кальция: специфические субстраты.
• Бромкрезоловый пурпурный: индикатор pH.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Диспергируйте среду с помощью блендера.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин. Условие «A» соответствует давлению 10 фунтов, то есть приблизительно 0,069 МПа (≈0,69 бар).
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и проведение количественного определения

1. Для количественного определения приготовьте десятичные разведения культур.
2. Выполните поверхностный посев разведений на чашки с агаризованной средой.
3. Инкубируйте чашки при 32 °C в течение 36–40 ч.
4. Подсчитайте жёлтые колонии подвида cremoris.
5. Продолжите инкубацию чашек в течение 4 суток.
6. Подсчитайте общее количество колоний с прозрачными зонами, относящихся к подвиду diacetylactis.
7. Вычтите количество колоний diacetylactis из общего количества колоний, чтобы определить численность Lactococcus lactis в смеси.

Ограничения применения

• Используйте только хорошо изолированные колонии.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется светло-жёлтая опалесцирующая среда с зеленоватым оттенком.

Реакция

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,8 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 32 °C в течение до 4 суток.

Хранение и срок годности

• Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Инструкции по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Отличительные особенности среды

Среда HiMedia MV926-500G отличается от сред на основе пептонов животного происхождения полной заменой таких пептонов растительными компонентами HiVeg® и соевым пептоном; дифференциация молочнокислых стрептококков проводится по окраске колоний и образованию прозрачных зон при утилизации цитрата кальция.