HiMedia MV915-500G Основа дигидролазного HiVeg бульона

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MV915-500G «Основа дигидролазного HiVeg бульона» с конечным pH 6,8 ± 0,2 предназначена для микробиологических исследований. Среда используется для изучения реакции дигидролазы у Vibrio parahaemolyticus; масса упаковки составляет 500 г.

Назначение

Основа дигидролазного HiVeg-бульона рекомендована для изучения реакции дигидролазы у Vibrio parahaemolyticus в чистых изолятах из пищевых образцов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 43,03 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разделите приготовленный раствор на две части.
4. В первую часть добавьте 0,5 % L-аргинина.
5. Вторую часть используйте как базовый бульон без L-аргинина для контрольного сравнения.
6. Полностью растворите компоненты.
7. Разлейте среду по 3,0 мл в пробирки с завинчивающимися крышками размером 13 × 100 мм.
8. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 15 мин.

Указание производителя: режим A соответствует давлению 10 фунтов на квадратный дюйм, то есть примерно 0,069 МПа или 0,69 бар.

Принцип действия и интерпретация

Виды рода Vibrio относительно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины.

Vibrio parahaemolyticus является одной из основных причин бактериальной диареи, связанной с употреблением загрязнённых пищевых продуктов. Основа дигидролазного бульона сформулирована в соответствии с методикой APHA и применяется для изучения реакции дигидролазы у V. parahaemolyticus.

Декстроза утилизируется видами рода Vibrio. Снижение pH, происходящее в процессе утилизации декстрозы, выявляется по изменению окраски индикатора — бромкрезолового пурпурного — с пурпурной на жёлтую.

Среда дополнена L-аргинином, который используется как субстрат для реакции дигидролазы. Фермент дигидролаза превращает L-аргинин в путресцин. При этом путресцин также может образовываться из аргинина в результате работы декарбоксилазной системы:

• L-аргинин подвергается декарбоксилированию с образованием агматина;
• агматин расщепляется ферментом агматиндегидролазой;
• образуются путресцин, CO₂ и аммиак через промежуточное соединение монокарбаминилпутресцин.

Образование амина, такого как путресцин, повышает pH среды. В результате индикатор меняет окраску с жёлтой на пурпурную. Бромкрезоловый пурпурный является индикатором pH и при щелочном pH изменяет окраску с жёлтой на пурпурную.

Для подтверждения результата рекомендуется инокулировать пробирку с базовой средой, не содержащей L-аргинин. Подщелачивание поверхности среды может быть вызвано контактом с воздухом, поэтому организм, не обладающий дигидролазной активностью, может быть ошибочно идентифицирован как положительный. Для защиты инокулированных пробирок от воздуха рекомендуется покрывать поверхность стерильным минеральным маслом.

Дигидролазный HiVeg-бульон изготавливается с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Функции компонентов среды:

• пептон HiVeg®™ и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества, необходимые для роста бактерий;
• декстроза является ферментируемым углеводом;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Тип образца

Чистые изоляты из пищевых образцов.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Инокулированные пробирки рекомендуется защищать от контакта с воздухом, покрывая среду стерильным минеральным маслом.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка.

Реакция

Реакция 4,3 % водного раствора по массе к объёму при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 0,5 % L-аргинина и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения закрытого контейнера: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотно закрывать флакон после каждого использования для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в течение срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель