HiMedia MV915-500G Основа дигидролазного HiVeg бульона

Основа дигидролазного HiVeg бульона HiMedia MV915-500G для изучения дигидролазной реакции Vibrio parahaemolyticus. Применяется для идентификации чистых изолятов из проб пищевых продуктов; состав среды разработан в соответствии со стандартами APHA.

Принцип измерения

Среда используется для определения способности бактерий расщеплять L-аргинин с помощью фермента дигидролазы. В состав входит декстроза, которая утилизируется видами Vibrio, что приводит к снижению pH и изменению цвета индикатора бромкрезолового пурпурного с пурпурного на жёлтый.

При добавлении L-аргинина в качестве субстрата дигидролазный фермент превращает его в путресцин. Также путресцин может образовываться через систему декарбоксилазы: L-аргинин декарбоксилируется до агматина, который затем катализируется ферментом агматин-дигидролазой до путресцина, CO₂ и аммиака через промежуточное соединение монокарбаминилпутресцин. Образование аминоподобного путресцина повышает pH среды, что возвращает цвет индикатора из жёлтого в пурпурный.

Для подтверждения результата рекомендуется инокулировать контрольную пробирку с базовой средой без L-аргинина.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и анализа

1. Растворите 43,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагрейте для полного растворения.
2. Разделите раствор на две части:
   • В первую часть добавьте L-аргинин до концентрации 0,5 % (рабочая среда).
   • Вторую часть используйте как базовый бульон (контроль).
3. Распределите по 3,0 мл среды в пробирки с завинчивающимися крышками размером 13 × 100 мм.
4. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 15 минут (давление ≈ 0,07 МПа).
5. Внесите исследуемый образец (чистые изоляты из пищевых продуктов).
6. Для предотвращения ложноположительных результатов (защелачивания поверхности среды из-за контакта с воздухом) рекомендуется защитить инокулированные пробирки слоем стерильного минерального масла.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 4,3% (м/об) водного раствора при 25 °C составляет 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 0,5 % L-аргинина после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствует номерам WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими и пищевыми образцами.
• Утилизация: загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательному стерилизованию в автоклаве или сжиганию.