HiMedia MV912-100G Основа HiVeg среды для теста на декарбоксилазу

Основа питательной среды для теста на декарбоксилазу HiMedia MV912-100G предназначена для определения активности декарбоксилаз и выпускается в виде порошка на растительной основе. HiMedia MV912-100G используют для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты; готовую среду стерилизуют при 121 °C в течение 15 мин и хранят при 2–8 °C.

Назначение

Основа среды Decarboxylase Test HiVeg® Medium Base (Falkow) предназначена для тестирования активности декарбоксилаз.

Препарат применяют для определения активности декарбоксилаз аминокислот, включая лизиндекарбоксилазу, аргининдекарбоксилазу и орнитиндекарбоксилазу. Среда предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты, в том числе для выявления активности дигидролазы и декарбоксилазы у Vibrio cholerae и других представителей рода Vibrio.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Профиль продукта

Принцип действия и интерпретация результатов

В среде пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами растительного происхождения, не связанными с рисками BSE/TSE.

Decarboxylase Test HiVeg® Medium Base представляет собой модификацию основы среды для теста на декарбоксилазу, применяемой для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Практическое применение теста на декарбоксилазную активность аминокислот было разработано для различения различных микроорганизмов. Работы по бактериальным декарбоксилазам аминокислот показали, что образование лизиндекарбоксилазы, аргининдекарбоксилазы и орнитиндекарбоксилазы различными представителями семейства Enterobacteriaceae является важным дополнительным параметром при проведении других биохимических тестов для дифференциации близкородственных групп бактерий.

Для дифференциации Salmonella arizonae и Citrobacter применялась среда, основанная на реакции декарбоксилирования лизина. Среда с лизиндекарбоксилазой также используется для дифференциации представителей родов Salmonella и Shigella с получением воспроизводимых результатов.

Декстроза ферментируется кишечными бактериями, что приводит к снижению pH и подкислению среды. Бактерии, образующие лизиндекарбоксилазу, орнитиндекарбоксилазу или аргининдекарбоксилазу, формируют щелочные продукты и повышают pH. Реакцию оценивают через 24–96 ч:

• у бактерий, образующих декарбоксилазу, развивается щелочная реакция, проявляющаяся фиолетовой окраской;
• у бактерий, не образующих декарбоксилазу, развивается кислая реакция, проявляющаяся жёлтой окраской.

Инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом: поверхность среды перекрывают стерильным минеральным маслом. Это предотвращает ложное защелачивание поверхности среды. Контрольные пробирки с базовой средой также необходимо инокулировать.

Биохимическое тестирование следует проводить только на чистой изолированной культуре и после выполнения дифференциальных определений. Реакции декарбоксилазы могут служить ориентировочным признаком рода или вида, однако окончательная идентификация микроорганизма не может основываться исключительно на результатах декарбоксилазных реакций.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 9,0 г препарата в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разделите приготовленный объём на четыре равные части.
4. Одну часть разлейте без добавления аминокислот.
5. В каждую из трёх оставшихся частей отдельно добавьте одну из следующих L-аминокислот: гидрохлорид лизина, гидрохлорид аргинина или гидрохлорид орнитина.
6. Доведите конечную концентрацию каждой добавленной аминокислоты до 0,5 %.
7. Разлейте среду по 3–4 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
8. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
9. При проведении теста инокулированные пробирки перекройте стерильным минеральным маслом для защиты от воздуха.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность раствора

Раствор фиолетового цвета, прозрачный, без образования осадка в пробирках.

Реакция среды

Реакция 0,9 % водного раствора: pH 6,8 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 4 суток после добавления L-лизина, L-аргинина и L-орнитина.

Обозначения реакций:

• + — положительная реакция, фиолетовая окраска;
• − — отрицательная реакция, жёлтая окраска;
• ± — вариабельная реакция;
• (+) — замедленная положительная реакция;
• * — инокулированные пробирки перекрыты минераль