HiMedia MV908-500G Основа Campylo тиогликолевой HiVeg среды

Питательная среда HiMedia MV908-500G Основа Campylo тиогликолевой HiVeg среды представляет собой сухую порошкообразную основу массой 500 г для приготовления культуральной среды, хранение которой допускается при 10–30 °C. Применяется для поддержания, транспортировки и хранения культур бактерий рода Campylobacter, а также для обогащения образцов кала и работы с пищевыми и молочными пробами.

Назначение

Основа Campylo тиогликолевой HiVeg среды предназначена для поддержания, транспортировки и хранения культур видов Campylobacter. Среда также используется для обогащения Campylobacter из образцов кала, когда немедленное исследование и тестирование проб невозможно.

Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы.

Состав

Состав, г/л:

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Инфекции, вызываемые Campylobacter, возникают спорадически в летние месяцы и обычно связаны с употреблением неправильно обработанных или недостаточно приготовленных пищевых продуктов, прежде всего мяса птицы.

Campylobacter jejuni может быть выделен на селективной среде с добавлением противомикробных препаратов из фекалий пациентов с диареей и гастроэнтеритом методом фильтрации. Противомикробные препараты подавляют нормальную кишечную микрофлору фекалий. В селективной среде Скирроу применялась комбинация из трёх противомикробных препаратов: ванкомицина, полимиксина B и триметоприма.

Позднее C. jejuni выделяли прямым посевом образцов кала на агаровую среду, содержащую четыре антибиотика. Также было показано, что C. jejuni может быть выделен из образцов кала, хранившихся при температуре охлаждения в течение 8–10 ч в тиогликолевом бульоне с добавлением четырёх антибиотиков. Позднее в состав была включена пятая антибиотическая компонента — цефалотин — для подавления непатогенного Campylobacter fetus.

Основа Campylo тиогликолевой среды с антибиотиками обычно используется как транспортно-сохраняющая среда, если немедленное исследование и тестирование образцов невозможно. Среда также рекомендована APHA для поддержания, транспортировки и хранения культур видов Campylobacter. Дополнительно среда применяется для обогащения Campylobacter из образцов кала.

Среда содержит питательные компоненты, необходимые для роста видов Campylobacter. Селективная добавка I для Campylobacter Blaser-Wang FD006 содержит пять антибиотиков: амфотерицин B, цефалотин, полимиксин B, триметоприм и ванкомицин. Эти компоненты подавляют размножение нормальной микрофлоры в фекальных образцах и способствуют выделению C. jejuni.

Цефалотин не всегда подавляет виды C. fetus; некоторые штаммы могут расти при 42 °C. Для подтверждения C. jejuni необходимо выполнить дополнительные тесты.

Основа Campylo тиогликолевой HiVeg® среды изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Приготовление среды и методика работы

1. Суспендируйте 26,8 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения, чтобы полностью растворить компоненты среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов давления, что соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для придания среде селективности в отношении видов Campylobacter добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки I для Campylobacter Blaser-Wang FD006.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или распределите в соответствии с требуемым способом применения.

Ректальные тампоны можно непосредственно вносить в среду, разлитую в пробирки. Около 5 капель образца кала следует поместить в среду на глубину приблизительно 1 см ниже поверхности. Если кал имеет твёрдую консистенцию, предварительно приготовьте суспензию в физиологическом растворе.

Инокулированную основу Campylo тиогликолевой среды можно хранить в холодильнике, а затем выполнить пересев на основу агара для Campylobacter M994 с добавлением селективной добавки I для Campylobacter Blaser-Wang FD006.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различные варианты роста на среде.
• Среда обычно используется как транспортно-сохраняющая, если немедленное исследование и тестирование образцов невозможно.
• Цефалотин не всегда подавляет виды C. fetus; некоторые штаммы могут расти при 42 °C.
• Для подтверждения C. jejuni необходимо провести дополнительные тесты.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Высоковязкий раствор, сопоставимый с 0,16%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор светло- или средне-янтарного цвета, с очень слабой опалесценцией.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,68 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации в течение 18–24 ч при 42 °C в атмосфере, содержащей 5–15 % O₂ и 5–12 % CO₂, с добавленной селективной добавкой Blaser-Wang FD006.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Это предотвращает образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности,