HiMedia MV890A-500G Основа HiVeg среды для обогащения листерий

Основа HiVeg среды для обогащения листерий HiMedia MV890A-500G предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes. Среда разработана на основе растительных компонентов (HiVeg), что исключает риски заражения BSE/TSE; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда основана на модификации Университета Вермонта (UVM) и предназначена для двухэтапного селективного обогащения, что обеспечивает более высокую скорость и эффективность выделения L. monocytogenes из пищевых продуктов (в частности, мясных) в течение 3–4 дней.

В составе используются гидролизат, пептон № 3 и экстракт HiVeg, а также дрожжевой экстракт, которые обеспечивают необходимые азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Эскулин придает среде дифференциальные свойства. Селективность в отношении Listeria достигается за счет высокой концентрации фосфатов в сочетании с налидиксовой кислотой и гидрохлоридом акрифлавина:

• Налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов.
• Гидрохлорид акрифлавина ингибирует рост большинства грамположительных организмов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27,17 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона восстановителя UVM Selective Supplement I (FD136) для первичного обогащения или 1 флакона UVM Selective Supplement II (FD137) для вторичного обогащения.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура выделения

1. Первичное выделение: внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл среды с добавлением добавки UVM Selective Supplement I (FD136). После 24 часов инкубации высейте 0,2 мл среды на чашки с селективным агаром для листерий Listeria Selective HiVeg™ Agar (MV567).
2. Вторичное выделение: одновременно с первым этапом перенесите 0,1 мл первичного обогащенного бульона в 10 мл свежей среды с добавкой UVM Selective Supplement II (FD137). После 24 часов инкубации высейте 0,2 мл данной среды на чашки Listeria Selective HiVeg® Agar (MV567).

Важно: Бульонные культуры Listeria более опасны, чем колонии на агаре, поэтому при работе с ними необходимо соблюдать строгие меры предосторожности.

Технические характеристики

Состав, г/л

Общие параметры

• Происхождение: без содержания компонентов животного происхождения (растительная основа)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до светло-коричневого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный раствор, слегка опалесцирующий с голубоватым оттенком
• pH (5,43% водный раствор при 25 °C): 7,4 ± 0,2 (диапазон 7,20–7,60)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для селективного выделения L. monocytogenes из клинических образцов и пищевых продуктов.

Ограничения: Среда не является дифференциальной, поэтому для окончательной идентификации видов Listeria требуется проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.