HiMedia MV890A-100G Основа HiVeg среды для обогащения листерий

Основа сухой питательной среды HiMedia MV890A-100G HiVeg для обогащения листерий. Рекомендуется для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов и пищевых продуктов.

Принцип измерения

Среда основана на модификации Университета Вермонта (UVM), которая предполагает двухэтапное селективное обогащение для повышения эффективности выделения L. monocytogenes из мясных продуктов в течение 3–4 дней. Данная основа HiVeg® изготовлена с использованием растительных пептонов вместо компонентов животного происхождения, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Гидролизат HiVeg®, пептон № 3 HiVeg®, экстракт HiVeg® и экстракт дрожжей: обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и необходимые питательные вещества.
• Эскулин: придает среде дифференциальные свойства.
• Налидиксовая кислота и гидрохлорид акрифлавина (добавляются в виде селективных добавок) в сочетании с высокой концентрацией фосфатов обеспечивают селективность: налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов, а акрифлавин — грамположительных.

Методика проведения анализа

Для первичного выделения вносят 25 г или 25 мл образца в 225 мл среды Listeria Enrichment Medium Base с добавлением селективной добавки UVM I (FD136).

1. После 24 часов инкубации 0,2 мл данной среды высевают на чашки с селективным агаром для листерий Listeria Selective HiVeg® Agar (MV567).
2. Одновременно с этим 0,1 мл бульона из первичного обогащения переносят в 10 мл свежей среды Listeria Enrichment Medium Base с добавлением селективной добавки UVM II (FD137) для вторичного обогащения.
3. После еще 24 часов инкубации 0,2 мл этой среды высевают на чашки с селективным агаром Listeria Selective HiVeg® Agar (MV567).

Примечание: Бульонные культуры Listeria более опасны, чем колонии на агаре, поэтому при работе с ними необходимо соблюдать строгие меры предосторожности.

Приготовление среды

1. Суспендировать 27,17 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое 1 флакона регидратированной селективной добавки UVM I (FD136) для первичного обогащения или 1 флакона селективной добавки UVM II (FD137) для вторичного обогащения, в зависимости от задачи.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам или колбам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение: без компонентов животного происхождения (растительная основа)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г
• Назначение: основа среды

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от кремового до светло-коричневого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный раствор, слегка опалесцирующий с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 7,4 ± 0,2 (для 5,43% в/в водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда не является дифференциальной; для окончательной идентификации видов Listeria требуется дополнительное биохимическое тестирование.
• После использования все загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.
• При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая стандартные