HiMedia MV889-500G Основа селективного HiVeg бульона для листерий

Микробиологическая питательная среда HiMedia MV889-500G Основа селективного HiVeg бульона для листерий производства HiMedia представляет собой порошок массой 500 г для приготовления селективной среды. HiMedia MV889-500G предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов; температура хранения сухого препарата составляет 10–30 °C.

Назначение и область применения

Основа селективного HiVeg бульона для листерий рекомендована для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов, включая ткани и биологические жидкости. Среда также применяется для обогащения проб молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов с последующим пересевом на селективный агар для листерий.

Препарат изготовлен без компонентов животного происхождения: животный пептон полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE.

Тип образца

• Клинические образцы: ткани организма или биологические жидкости.

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — короткая грамположительная неспорообразующая палочковидная бактерия, которая в старых культурах может иметь кокковидную форму. Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 °C до 45 °C; оптимальный диапазон составляет 30–37 °C.

Listeria monocytogenes выделяют из многочисленных объектов окружающей среды, включая силос, почву, разлагающуюся растительность, сточные воды, влажную землю, солому и фекалии. Небольшое количество микроорганизмов часто обнаруживается в сыром молоке, мясе, овощах, морепродуктах и объектах пищевого производства.

Для выделения небольшого количества Listeria monocytogenes используют процедуры обогащения. Повреждённые клетки L. monocytogenes подвергаются сублетальному стрессу при воздействии нагревания, замораживания или кислой среды. Для восстановления таких клеток требуется инкубация в неселективной среде при температуре, благоприятной для устранения сублетальных повреждений.

Селективный бульон для листерий сформулирован для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов. Селективность среде придаётся добавлением селективной добавки:

• гидролизат HiVeg®, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают соединения углерода и азота, аминокислоты с длинной цепью и витамины, необходимые для бактериального метаболизма;
• декстроза служит источником энергии;
• циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов;
• налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов;
• акрифлавин подавляет грамположительные микроорганизмы.

Акрифлавин представляет собой производное акридина с бактериостатическими свойствами в отношении многих грамположительных бактерий и слабой фунгицидной активностью.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 36,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до комнатной температуры.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки для листерий II (FD063) или двух флаконов селективной добавки для листерий II (FD063I) — в зависимости от требуемой схемы.
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Методика обогащения и пересева

1. Внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл среды в пакет для гомогенизации.
2. При необходимости гомогенизируйте материал.
3. Инкубируйте при 30 °C продолжительностью до 7 суток.
4. Выполните пересев обогатительного бульона на селективный HiVeg® агар для листерий (MV567) после 1, 2 и 7 суток инкубации.

Срок инкубации 7 суток обеспечивает более эффективное восстановление подвергшихся стрессу клеток Listeria из молока и молочных продуктов.

Требования к образцам и обращению

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Listeria monocytogenes относится к высокопатогенным микроорганизмам. При работе с культурой и образцами необходимо соблюдать надлежащие меры предосторожности, правила микробиологической безопасности и стандартные меры предосторожности для клинического материала.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости ознакомьтесь с требованиями безопасности в соответствующих паспортах безопасности материалов.

Ограничения метода

1. Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.
2. Listeria monocytogenes является высокопатогенным микроорганизмом; при работе с ним необходимо соблюдать соответствующие меры предосторожности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор флуоресцентно-жёлтого цвета в пробирках.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,6 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки для листерий II (FD063 / FD0631) и инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики