HiMedia MV882-500G Основа HiVeg агара для вирулентности дифтерии

Основа питательной среды HiMedia MV882-500G Основа HiVeg агара для вирулентности дифтерии производства HiMedia — порошковая среда на основе растительного пептона HiVeg® No. 3. Предназначена для тестирования токсигенности Corynebacterium diphtheriae с использованием дифтерийной сыворотки-антитоксина, теллурита калия и инкубации при 35–37 °C.

Назначение

Основа HiVeg агара для вирулентности дифтерии с добавками применяется для определения токсигенности Corynebacterium diphtheriae.

Состав

• Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 37,5 г среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите стерильную среду до 55–60 °C.
5. В асептических условиях внесите в чашку Петри диаметром 100 мм 2 мл стерильной добавки для определения вирулентности дифтерии FD072 и 0,5 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия FD052.
6. Быстро добавьте в чашку 10 мл стерильной основы агара HiVeg для определения вирулентности дифтерии.
7. До затвердевания среды поместите поперёк диаметра чашки полоску фильтровальной бумаги, насыщенную активным дифтерийным антитоксином.
8. Дайте полоске опуститься на дно чашки.
9. Выполните массивный посев исследуемой культуры поперёк полоски.

Принцип измерения и интерпретация

Основа агара HiVeg для определения вирулентности дифтерии содержит пептон HiVeg® No. 3 растительного происхождения, не связанный с рисками BSE/TSE, вместо протеозного пептона, применяемого в традиционной среде.

Среда представляет собой модификацию основы агара для определения вирулентности дифтерии, разработанной по Hermann и др. для обеспечения обильного роста Corynebacterium diphtheriae. Elek продемонстрировал метод диффузии в агаре для определения вирулентности Corynebacterium diphtheriae in vitro. King и соавторы стандартизировали среду сравнением результатов с тестами на животных для получения воспроизводимых результатов. При этом было установлено, что сыворотка разных животных даёт различные результаты. Hermann и соавторы разработали среду для устранения этих затруднений.

Представленная среда приготовлена по тому же принципу, однако вместо пептона животного происхождения используется растительный пептон. После инкубации засеянной чашки у токсигенных штаммов наблюдается линия преципитина.

Теллурит калия ингибирует большинство грамотрицательных бактерий, за исключением представителей рода Corynebacterium, а также Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius и энтерококков. Staphylococcus epidermidis может демонстрировать рост.

Профиль продукта

Вариант на растительной основе

• Код серии: MV
• Код продукта: MV882
• Пептон: HiVeg® No. 3
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа

Сравнение с вариантом на животной основе

• Код продукта: M882
• Пептон: протеозный пептон

Техническое отличие MV882 от M882 заключается в использовании растительного пептона HiVeg® No. 3 вместо протеозного пептона животного происхождения.

Параметры приготовления и хранения

• Норма восстановления: 37,5 г/л
• Объём приготовленной среды из упаковки 500 г: 13,33 л
• pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• Добавка: Diphtheria Virulence Supplement FD072
• Дополнительный реагент: теллурит калия FD052
• Стерилизация: 121 °C / 15 мин
• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет порошка — светло-жёлтый, возможно наличие слегка зеленоватого оттенка; порошок однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция среды

• Концентрация водного раствора: 3,75 % масс./об.
• pH раствора при 25 °C: 7,8 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации в течение 24–72 ч при 35–37 °C с добавлением Diphtheria Virulence Supplement FD072 и 1%-ного раствора теллурита калия FD052.

Технические характеристики