HiMedia MV882-500G Основа HiVeg агара для вирулентности дифтерии

Основа HiVeg агара для вирулентности дифтерии HiMedia MV882-500G на растительной основе. Применяется для тестирования токсигенности Corynebacterium diphtheriae; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда разработана на основе модификации по Германну и др. для обеспечения обильного роста Corynebacterium diphtheriae. В данной версии вместо протеоз-пептона используется растительный пептон HiVeg® № 3, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Метод основан на технике диффузии в агаре (метод Элека) для определения вирулентности Corynebacterium diphtheriae in-vitro. При инкубации инокулированной среды у токсигенных штаммов наблюдается линия преципитации. Добавление теллурита калия подавляет рост большинства грамотрицательных бактерий, за исключением видов Corynebacterium, Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius и энтерококков. Возможен рост Staphylococcus epidermidis.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,8 ± 0,2.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 37,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 55–60 °C.

Процедура анализа

1. В чашку Петри диаметром 100 мм асептически внесите 2 мл стерильной добавки для определения вирулентности дифтерии (Diphtheria Virulence Supplement, FD072) и 0,5 мл стерильного 1% раствора теллурита калия (FD052).
2. Быстро добавьте 10 мл стерильной основы HiVeg агара для вирулентности дифтерии.
3. До затвердевания среды поместите по диаметру чашки полоску фильтровальной бумаги, насыщенную активным антитоксином дифтерии, так, чтобы она опустилась на дно.
4. Произведите инокуляцию чашки плотной посевной дозой поперек полоски бумаги.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок светло-желтого цвета, может иметь зеленоватый оттенок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: янтарный цвет, в чашках Петри образуется слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 3,75% (масса/объем) водного раствора составляет 7,8 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации в течение 24–72 часов при 35–37 °C с добавлением добавки для вирулентности дифтерии (FD072) и 1% раствора теллурита калия (FD052).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.

Совместимость и дополнения

Для полноценного использования среды требуются следующие компоненты:

• Добавка для определения вирулентности дифтерии (Diphtheria Virulence Supplement, FD072).
• 1% раствор теллурита калия (Potassium Tellurite, FD052).