HiMedia MV845-100G Основа лизин-железо-цистинового HiVeg бульона

Основа лизин-железо-цистинового HiVeg бульона HiMedia MV845-100G предназначена для экспресс-детектирования Salmonellae в пищевых продуктах, ингредиентах и кормах. Среда разработана на растительной основе (HiVeg®), что исключает риски заражения BSE/TSE; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию формулы Hoben, Aston и Peterson. Использование HiVeg® гидролизата вместо ферментного гидролизата казеина делает среду свободной от рисков BSE/TSE.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• HiVeg® гидролизат и L-цистин: источники углерода и азота.
• Экстракт дрожжей: обеспечивает комплекс витаминов группы B.
• Декстроза, маннит и салицин: ферментируемые углеводы.
• Цитрат аммония-железа и тиосульфат натрия: индикаторы образования сероводорода (H₂S).
• Лизин: субстрат, подвергающийся либо декарбоксилированию, либо дезаминированию.

Методика проведения анализа

Процедура посева и инкубации

1. 25 г исследуемого образца добавляют в лактозный HiVeg бульон (MV026), перемешивают и инкубируют 24 часа при 35 ± 2 °C.
2. 1 мл полученной культуры переносят в 10 мл тетратионатного HiVeg бульона (MV032) и инкубируют при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
3. 1 мл из этой вторичной культуры переносят в 10 мл основы лизин-железо-цистинового HiVeg бульона с добавлением новобиоцина и инкубируют при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
4. Для исключения возможности пропуска штаммов Salmonellae, не продуцирующих H₂S, инкубацию продлевают еще на 16–24 часа.

Интерпретация результатов

В каждую пробирку добавляют 0,1 мл раствора бромтимолового синего (0,3 %) в 0,1 N NaOH и 50 % этаноле. Изменение цвета с желтого на темно-зеленый или синий указывает на щелочную реакцию и наличие видов Salmonella.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 25,7 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до комнатной температуры и асептически добавить одну ампулу реконструированной селективной добавки новобиоцина (FD101).
5. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные пробирки.

Технические характеристики

Общие параметры

• Концентрация при приготовлении: 25,7 г/л
• Объем готовой среды из 100 г порошка: 3,89 л
• pH (при 25 °C): 6,2 ± 0,2
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Условия хранения (сухая среда): ниже 30 °C
• Условия хранения (готовая среда): 2–8 °C

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок светло-розового цвета.
• Цвет и прозрачность: красноватый прозрачный раствор с небольшим количеством частиц.
• Реакция: pH 2,57% водного раствора составляет 6,2 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением селективной добавки новобиоцина (FD101).

* — после добавления бромтимолового синего.

• — почернение среды.

Совместимость и дополнения

Для обеспечения селективности среды необходимо использование:

• Селективная добавка новобиоцина (Novobiocin Selective Supplement FD101).