HiMedia MV843-500G Основа селективного HiVeg агара для Yersinia

Питательная среда HiMedia MV843-500G Основа селективного HiVeg агара для Yersinia — порошкообразная основа на растительных пептонах для селективного выделения и количественного определения Yersinia enterocolitica. Применяется при анализе пищевых и молочных образцов; после приготовления требует добавления селективной добавки CTN Selective Supplement (FD034) и хранения готовой среды при 2–8 °C.

Назначение и тип образцов

Основа предназначена для селективного выделения и количественного определения Yersinia enterocolitica из различных образцов.

Тип образцов: пищевые и молочные продукты.

Для отбора и обработки пищевых и молочных образцов необходимо применять соответствующие методики согласно действующим руководствам.

Состав

Концентрация компонентов указана в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Методика приготовления

1. Взвесьте 29,02 г порошка и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки CTN Selective Supplement (FD034).
6. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Yersinia enterocolitica широко распространена в озёрах и водохранилищах. У различных животных происходят эпизоотические вспышки диареи, лимфаденопатии, пневмонии и самопроизвольных абортов. Yersinia enterocolitica является наиболее часто выделяемым из образцов видом рода Yersinia. Биохимическая активность Yersinia enterocolitica при комнатной температуре выше, чем при 37 °C.

В среде животные пептоны полностью заменены растительными пептонами, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерные для животных пептонов.

Среда применяется для выделения Yersinia enterocolitica из образцов. Формуляция сред на основе животных компонентов разработана на основе агара CIN по Schiemann и рекомендована комитетом ISO. В исходной формуле среды CIN Schiemann заменил желчные соли дезоксихолатом натрия. В рассматриваемой среде желчные соли заменены синтетическим моющим средством № III.

Среда дифференцирует бактерии, ферментирующие маннитол, и бактерии, не ферментирующие маннитол:

• микроорганизмы, ферментирующие маннитол, подкисляют среду и вызывают локальное снижение pH вокруг колоний;
• в присутствии нейтрального красного колонии приобретают красную окраску;
• микроорганизмы, не ферментирующие маннитол, образуют бесцветные и полупрозрачные колонии.

Селективность среды обеспечивается синтетическим моющим средством № III и кристаллическим фиолетовым, которые подавляют грамположительные и ряд грамотрицательных бактерий. Добавление антибиотической селективной добавки повышает селективность среды для выделения Yersinia.

Типичные колонии Yersinia enterocolitica имеют тёмно-красную окраску и напоминают мишень; обычно колонии окружены прозрачной зоной. Размер колоний, степень гладкости и соотношение диаметров зоны и центра могут различаться у разных серотипов.

По сравнению со средами, содержащими пептоны животного происхождения, MV843-500G изготовлена с полной заменой животных пептонов на растительные и предназначена для применения с селективной добавкой CTN Selective Supplement (FD034).

Методика выделения Yersinia enterocolitica

Прямой посев и заливка

Для выделения Yersinia enterocolitica методом прямого посева или заливки непосредственно внесите образец в приготовленную среду. Инкубируйте при 22–32 °C в течение 24–48 ч.

Обогащение образца

1. Суспендируйте образец — пищевой продукт, фекалии или другой материал — в стерильном фосфатно-солевом буферном растворе.
2. Инкубируйте суспензию при 4 °C до 21 суток.
3. Периодически пересевайте образцы на чашки с агаризованной средой.
4. Инкубируйте чашки при 22–32 °C в течение 24–48 ч.

Культурные характеристики

Культурные характеристики определяют на среде с добавленной селективной добавкой CTN Selective Supplement (FD034) после инкубации при 22–32 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,25%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,8 % (масс./об.) при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Ограничения метода

Serratia liquefaciens, Citrobacter freundi и Enterobacter agglomerans могут иметь вид, сходный с Yersinia enterocolitica. Для дальнейшей идентификации этих микроорганизмов необходимо провести биохимические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого