HiMedia MV836-500G Основа HiVeg агара для Clostridium difficile

Сухая питательная среда HiMedia MV836-500G Основа HiVeg агара для Clostridium difficile на растительной основе. Рекомендуется для селективного выделения Clostridium difficile из пищевых продуктов и других образцов.

Принцип измерения

Среда предназначена для первичного выделения C. difficile из фекальных проб. Состав разработан для обеспечения обильного роста целевого микроорганизма. Селективные агенты (D-циклосерин и цефокситин), добавляемые в основу, подавляют рост большинства представителей семейства Enterobacteriaceae, Enterococcus faecalis, стафилококков, грамотрицательных анаэробных бацилл и других видов Clostridium, которые могут присутствовать в образцах. Добавление 7 % (об/об) крови лошади повышает степень восстановления C. difficile и увеличивает размер колоний.

Основа HiVeg® изготовлена с полной заменой пептонов животного происхождения на растительные, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). В данной формуле отсутствует индикатор нейтральный красный, так как среда предназначена для использования с кровью лошади или овцы.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 34,55 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона селективной добавки CC Selective Supplement I (FD010) и 7 % (об/об) дефибринированной крови лошади или овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура посева и инкубации

1. Равномерно распределите часть фекального образца по поверхности среды для получения изолированных колоний.
2. Инкубируйте чашки в анаэробных условиях при 37 °C в течение 18–48 часов.

Интерпретация результатов

Через 48 часов C. difficile образует серовато-белые, неправильные, выпуклые и непрозрачные колонии диаметром 4–6 мм. Важно: Из-за наличия антибиотиков в среде типичная морфология при окрашивании по Граму может быть не выражена. Для подтверждения и получения характерной морфологии рекомендуется пересев на кровяной агар (M073). Колонии C. difficile на данной среде не проявляют типичной флуоресценции и окраски, в то время как другие клостридии могут флуоресцировать. Окончательная идентификация проводится с помощью окрашивания по Граму, биохимических тестов и определения специфических цитотоксинов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение: Растительное (Animal Free)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: Порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г
• pH готового раствора: 7,20–7,60

Контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 7 % крови лошади: вишнёво-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 6,91 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в анаэробных условиях с добавлением селективной добавки CC Selective Supplement I (FD010) и 7 % (об/об) дефибринированной крови лошади после инкубации при 35–37 °C в течение 48 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: Пищевые продукты, фекальные пробы.
• Ограничения: Для окончательной идентификации штамма необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Меры предосторожности: Работа с образцами должна проводиться в соответствии с правилами микробиологической безопасности. Загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: При температуре 2–8 °C.
• Срок годности: Согласно указанному на этикетке.