HiMedia MV834-100G Основа кровяного агара №2, HiVeg

Питательная среда HiMedia MV834-100G Основа кровяного агара №2, HiVeg предназначена для максимального выделения требовательных патогенных микроорганизмов без влияния на их гемолитические реакции. Основа используется для приготовления кровяного и селективных агаров с добавлением дефибринированной крови и специфических добавок для Brucella, Campylobacter и стрептококков; содержание агара для варианта MV834 составляет 1,5 %.

Назначение

Основа кровяного агара №2, HiVeg применяется для культивирования требовательных патогенных микроорганизмов и оценки гемолитических реакций. Добавление 5–10 % крови обеспечивает дополнительные факторы роста и позволяет определять гемолиз.

Среда также может использоваться:

• для приготовления селективной среды для видов Brucella и Campylobacter с добавлением соответствующих антибиотических добавок;
• для первичного выделения видов Haemophilus с обогащением среды лошадиной кровью;
• для культивирования требовательных видов Streptococci и Pneumococci.

Состав

Варианты MV834 и MV834A отличаются содержанием агара и массой сухой среды, необходимой для приготовления 1 л.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Технические характеристики

Варианты состава

Растительная основа, код MV

• MV834/MV834A;
• пептон HiVeg® № 3;
• экстракт HiVeg® № 2.

Основа животного происхождения, код M

• M834/M834A;
• протеозопептон;
• печёночный экстракт.

Восстановление и выход приготовленной среды

Расход сухой среды

• MV834: 42,5 г/л;
• MV834A: 39,5 г/л.

Объём приготовленной среды

• упаковка 500 г, MV834: 11,76 л;
• упаковка 100 г, MV834: 2,35 л;
• упаковка 500 г, MV834A: 12,65 л.

Добавки

В качестве добавки используют дефибринированную кровь и лиофилизированные добавки по необходимости.

Для приготовления кровяного агара добавляют 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

Стерилизация и хранение

• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин.
• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 21,25 г MV834 или 19,75 г MV834A в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 40–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. При необходимости внесите соответствующую селективную или ростовую добавку.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Добавки для специализированных сред

Для видов Brucella:

• добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки для Brucella FD005 к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Для видов Campylobacter:

• добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки для Campylobacter I FD006, или
• добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки для Campylobacter II FD007, или
• добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки для Campylobacter III FD008, или
• добавьте восстановленное содержимое одного флакона ростовой добавки для Campylobacter FD009

к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Для стрептококков:

• добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки для стрептококков FD031 к 500 мл стерильной расплавленной основы;
• тщательно перемешайте;
• разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

В составе основы используются пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, поэтому среда не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Среда может применяться для приготовления селективных сред для видов Brucella и Campylobacter путём добавления антибиотической добавки, селективной для соответствующих бактерий, аналогично обычной основе кровяного агара.

По сравнению с другими основами кровяного агара основа кровяного агара №2, HiVeg обеспечивает усиленный рост, особенно требовательных микроорганизмов.

Культуры Brucella высокоинфективны; при работе с ними необходимо соблюдать меры предосторожности. Инкубацию предпочтительно проводить в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа.

В сравнительных исследованиях конской, кроличьей и овечьей крови было установлено, что овечья кровь обеспечивает наиболее чёткие и надёжные характеристики колоний и гемолиза через 24 и 48 ч.

Среда может использоваться для первичного выделения видов Haemophilus при обогащении лошадиной кровью. Для улучшения результатов половину чашки с конско-кровяным агаром обрабатывают двумя каплями 10%-ного сапонина.

Добавление экстракта HiVeg® № 2 и дрожжевого экстракта усиливает рост и гемолитические реакции требовательных микроорганизмов, таких как Streptococci и Pneumococci.

• Пептон HiVeg® № 3 служит источником азота.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Кровь служит источником дополнительных факторов роста и основой для определения гемолитических реакций.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем для MV834 или 1,2%-ным агаровым гелем для MV834A.

Цвет и прозрачность

Основная среда образует жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

После добавления 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Водный раствор MV834 с концентрацией 4,25 % масс./об. или MV834A с концентрацией 3,95 % масс./об. имеет pH 7,4 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики для MV834 оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч; для MV834A — после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Сравнительное техническое отличие

Вариант HiVeg использует пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, а добавление экстракта HiVeg® № 2 и дрожжевого экстракта предназначено для усиления роста и гемолитических реакций требовательных микроорганизмов.

Комплект поставки

• Основа кровяного агара №2, HiVeg, MV834, 100 г.

Совместимые добавки

• Селективная добавка для Brucella FD005.
• Добавка для Campylobacter I FD006.
• Добавка для Campylobacter II FD007.
• Добавка для Campylobacter III FD008.
• Ростовая добавка для Campylobacter FD009.
• Добавка для стрептококков FD031.