HiMedia MV832-500G Анаэробный HiVeg агар Уилкинса-Чалгрена

Анаэробный питательный агар HiMedia MV832-500G HiVeg агар Уилкинса–Чалгрена производства HiMedia для селективного выделения и культивирования анаэробных бактерий, масса упаковки — 500 г. Среда предназначена также для определения чувствительности анаэробных бактерий методом разведения в агаре и требует поддержания анаэробных условий для оптимального восстановления микроорганизмов.

Назначение

Анаэробный HiVeg агар Уилкинса–Чалгрена предназначен для:

• селективного выделения и культивирования анаэробных бактерий;
• определения чувствительности анаэробных бактерий методом разведения в агаре;
• культивирования определённых анаэробных бактерий после добавления соответствующих анаэробных добавок;
• получения селективной среды для неспорообразующих анаэробных бактерий и грамотрицательных анаэробных бактерий;
• культивирования требовательных анаэробных бактерий после дополнительного внесения дефибринированной или лизированной крови.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами среды.

Принцип действия и интерпретация

Анаэробные бактерии широко распространены в почве, болотах, донных отложениях озёр и рек, океанах, сточных водах, пищевых продуктах и организме животных. У человека анаэробные бактерии обычно присутствуют в полости рта, в области зубов, желудочно-кишечном тракте, отверстиях мочеполового тракта и на коже.

Анаэробные инфекции у человека и различных животных при иммунодефицитных состояниях могут поражать практически любой орган. Такие инфекции часто сопровождаются некрозом тканей и образованием абсцессов, что приводит к нарушению доставки противомикробных препаратов с кровью непосредственно к очагу инфекции. Поэтому лечение анаэробных инфекций часто включает санацию и удаление нежизнеспособных тканей, аспирацию и/или хирургическое удаление инфицированной ткани.

Из-за технических и интерпретационных трудностей, связанных с определением чувствительности анаэробных бактерий, формулирование окончательных рекомендаций по проведению испытаний затруднено. Анаэробная агаровая основа Уилкинса–Чалгрена, разработанная Wilkins и Chalgren, совместно с агаровой основой Brucella относится к предпочтительным средам для испытаний анаэробов методом разведения в агаре. Среда также рекомендована для тестирования анаэробных бактерий.

Агар Уилкинса–Чалгрена необходимо соответствующим образом дополнять для обеспечения роста некоторых анаэробных бактерий. Анаэробная агаровая основа HiVeg Уилкинса–Чалгрена изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, поэтому не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Пирофосфат железа и менадион (витамин K₃) усиливают рост видов Bacteroides и Prevotella melaninogenica соответственно, а также многих других видов грамотрицательных анаэробных палочек. Среду можно дополнительно обогащать дефибринированной или лизированной кровью для культивирования требовательных анаэробных бактерий.

Гидролизат HiVeg и пептон HiVeg служат источниками необходимых питательных веществ, включая углерод и азот. Дрожжевой экстракт обеспечивает среду витаминами и другими факторами роста, включая пурины и пиримидины, необходимые для роста Prevotella melaninogenica. Аргинин является источником аминокислот, а пируват — источником энергии.

Для получения селективной среды могут использоваться следующие добавки:

• анаэробная добавка FD001 — для неспорообразующих анаэробных бактерий;
• анаэробная споровая добавка FD002 — для грамотрицательных анаэробных бактерий.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 43,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C перед добавлением исследуемых антибиотиков.
5. Осторожно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
7. Для культивирования анаэробов асептически добавьте в стерильную расплавленную среду перед разливом в стерильные чашки Петри регидратированное содержимое двух флаконов анаэробной добавки FD001 или двух флаконов анаэробной добавки G.N. FD002 — в зависимости от требуемой селективности.
8. При необходимости для роста требовательных анаэробных бактерий дополнительно внесите дефибринированную или лизированную кровь.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Формирует плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для 4,3%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют с добавлением анаэробной добавки FD001 или анаэробной добавки G.N. FD002 в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Храните продукт в плотно закрытом контейнере.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

Необходимо поддерживать надлежащие анаэробные условия для оптимального восстановления микроорганизмов.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Требования безопасности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от сред на основе пептонов животного происхождения, HiVeg агар Уилкинса–Чалгрена содержит пептоны растительного происхождения и заявлен как продукт без компонентов животного происхождения.