HiMedia MV821-500G Основа солевого HiVeg бульона с полимиксином

Питательная среда HiMedia MV821-500G Основа солевого HiVeg бульона с полимиксином — сухая порошкообразная основа с конечным pH 8,8±0,2. Применяется для селективного обогащения видов Vibrio перед их выявлением и количественным определением; для работы требуется добавление селективной добавки с полимиксином B.

Назначение

Среда рекомендована для селективного обогащения видов Vibrio с последующим выявлением и количественным определением.

Тип образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Основа солевого HiVeg® бульона с полимиксином приготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, поэтому среда не содержит рисков, связанных с BSE/TSE.

Среда применяется с той же целью, что и солевой бульон с полимиксином, приготовленный по рекомендации APHA, — для выявления и количественного определения солеустойчивого Vibrio parahaemolyticus.

Виды Vibrio достаточно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины. Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, углеродом, серой, микроэлементами, аминокислотами с длинной цепью и витаминами группы B, необходимыми для роста микроорганизмов.

Сульфат полимиксина B подавляет грамположительные микроорганизмы. Высокая концентрация хлорида натрия и щелочное значение pH создают селективные условия для роста видов Vibrio.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 16,5 г сухой среды в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки с полимиксином B PolyB Selective Supplement (FD003).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Пробоподготовка и обращение с образцами

1. Взвесьте 50 г образца и перенесите в блендер.
2. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буферного раствора для разведения.
3. Гомогенизируйте образец в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная суспензия соответствует разведению 1:10.
4. При необходимости приготовьте разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие.
5. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительной среды — солевого бульона с полимиксином HiVeg® в концентрации 2×. Такая схема соответствует навеске образца массой 1 г.
6. Аналогично внесите три порции по 1 мл приготовленных разведений в 10 мл солевого бульона с полимиксином HiVeg® стандартной концентрации.
7. Инкубируйте пробирки при температуре 35±2 °C в течение 24 ч.
8. После инкубации выполните пересев петлёй на плотную среду, например на агар TCBS HiVeg® (MV189), для дальнейшего исследования.
9. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV821-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 8,8±0,2
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность

Светло-жёлтый, прозрачный раствор.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,3 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 8,8±0,2.

Диапазон pH

• pH: 8,60–9,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки с полимиксином B PolyB Selective Supplement (FD003) и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке. Приготовленную среду храните при температуре 15–25 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте упаковку. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для дальнейшего исследования требуется пересев на плотные питательные среды.
2. Для полной идентификации необходимы дополнительные серологические и биохимические исследования.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Техническое отличие

В составе основы используются пептоны растительного происхождения HiVeg® вместо пептонов животного происхождения; селективность в отношении видов Vibrio обеспечивается сочетанием полимиксина B, повышенной концентрации