HiMedia MV808-500G Основа яично-желточного агара, HiVeg

Основа питательной среды HiMedia MV808-500G «Основа яично-желточного агара, HiVeg» предназначена для выделения и идентификации клостридий и других анаэробных микроорганизмов. Препарат используют для анализа пищевых образцов, хранят при 10–30 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C.

Назначение

Рекомендуемое назначение: выделение и идентификация клостридий и других анаэробных микроорганизмов.

Тип образца: пищевые продукты.

Назначение изделия: основа питательной среды.

Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительного происхождения.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 75,10 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте по 90 мл в пробирки или колбы в зависимости от требуемого формата.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Добавьте 10 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045 на каждые 90 мл среды.
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Пищевое отравление, вызываемое Clostridium perfringens, относится к наиболее распространённым видам пищевых инфекций человека. Обычно заболевание связано с готовыми мясными продуктами или продуктами из мяса птицы, содержащими большое количество жизнеспособных клеток. Основные симптомы диареи при отравлении, вызванном C. perfringens, обусловлены термолабильным энтеротоксином, который вырабатывается только спорулирующими клетками.

Основа яично-желточного агара представляет собой модификацию основы агара Мак-Кланга—Тоубе, используемую для выделения и обнаружения Clostridium perfringens. В отличие от исходной формулы, состав содержит пирофосфат железа.

Основа яично-желточного агара HiVeg® изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения; это исключает риски, связанные с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями. Гидролизат HiVeg® № 1 и лактоза в среде служат соответственно источниками энергии и углерода.

Пептон HiVeg® № 3 обеспечивает среду необходимыми питательными веществами, а также углеродсодержащими и азотсодержащими соединениями. Фосфаты выполняют буферную функцию, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Сульфат магния служит источником двухвалентных катионов и сульфатов. Глюкоза является источником энергии. Пирофосфат железа способствует росту анаэробных микроорганизмов.

Микроорганизмы, продуцирующие лецитиназу, расщепляют лецитин, содержащийся в эмульсии яичного желтка, с образованием нерастворимого непрозрачного осадка вокруг колоний. Липазопродуцирующие микроорганизмы расщепляют свободные жирные кислоты в эмульсии яичного желтка, формируя переливчатый блеск на поверхности колоний. Активность липазы может проявляться с задержкой, поэтому чашки нельзя считать отрицательными и утилизировать до инкубации в течение одной недели. Протеолитическая активность определяется по прозрачным зонам вокруг колоний.

Среду следует инокулировать непосредственно исследуемым образцом.

Подготовка и обработка образцов

Перед инокуляцией чашки со средой необходимо восстановить, поместив их в анаэробный контейнер на 18–24 ч.

Одновременно с исследуемым образцом следует инокулировать обогатительный бульон для выявления небольшого количества анаэробных микроорганизмов.

Для выделения микроорганизмов следует применять стандартные процедуры.

Инкубацию проводят в течение 18–48 ч и продолжают до 7 суток.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Форма: однородный, сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базальная среда: гель среднего янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция

Реакция 7,5%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют на среде с добавленной эмульсией яичного желтка FD045 после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч. Чашки следует инкубировать до 7 суток, прежде чем считать результат отрицательным.

* Активность липазы может проявляться с задержкой; чашки не следует считать отрицательными до инкубации в течение одной недели.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить препарат в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, хорошо проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды оптимальны при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Активность липазы может проявляться с задержкой, поэтому чашки нельзя считать отрицательными до инкубации в течение одной недели.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики