HiMedia MV808-500G Основа яично-желточного агара, HiVeg

Основа яично-желточного агара HiMedia MV808-500G HiVeg для изоляции и идентификации Clostridia и других анаэробных микроорганизмов. Применяется для анализа проб пищевых продуктов; содержит пирофосфат железа для стимуляции роста анаэробов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию агара Маккланга-Тоабе (McClung Toabe), дополненную пирофосфатом железа. В данной версии (HiVeg®) животные пептоны заменены на растительные, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Основные компоненты и их функции:

• Растительный пептон HiVeg® № 3: источник основных питательных веществ, азота и углерода.
• Фосфаты: поддерживают pH среды.
• Хлорид натрия: обеспечивает осмотический баланс.
• Сульфат магния: источник двухвалентных катионов и сульфатов.
• Глюкоза: источник энергии.
• Пирофосфат железа: стимулирует рост анаэробных организмов.

Интерпретация результатов:

• Лецитиназная активность: организмы, вырабатывающие лецитиназу, расщепляют лецитин яичного желтка, образуя нерастворимый опалесцирующий (матовый) осадок вокруг колоний.
• Липазная активность: расщепление свободных жирных кислот желтка приводит к образованию радужного блеска на поверхности колоний.
• Протеолитическая активность: проявляется в виде зон просветления вокруг колоний.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 75,10 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по 90 мл в пробирки или колбы.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Добавьте по 10 мл стерильной эмульсии яичного желтка (артикул FD045) на каждые 90 мл среды.
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Подготовка: перед инокуляцией чашки с агаром следует выдержать в анаэробной банке в течение 18–24 часов для снижения окислительного потенциала.
2. Посев: образец (пищевой продукт) вносится непосредственно на поверхность среды. Рекомендуется одновременный посев в обогатительный бульон для обнаружения малого количества анаэробов.
3. Инкубация: в анаэробных условиях при 35–37 °C в течение 18–48 часов.
4. Контроль: инкубацию следует продолжать до 7 суток.

Технические характеристики

Общие параметры

• Назначение: основа питательной среды
• Вес: 500 г
• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: HiVeg™ (без компонентов животного происхождения)
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,5 % агаром
• Цвет и прозрачность (базовая среда): янтарный цвет, от прозрачного до слегка опалесцирующего геля
• Цвет и прозрачность (после добавления желтка): желтый непрозрачный гель
• Реакция (pH 7,5 % раствора при 25 °C): 7,6 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Результаты получены при использовании среды с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов.

* Чашки следует инкубировать до 7 дней, прежде чем считать результат отрицательным.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Липазная активность может проявляться с задержкой, поэтому нельзя считать результат отрицательным до истечения одной недели инкубации.
• При работе с образцами и культурами соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности. Использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.