HiMedia MV805-500G Основа Bacteroides HiVeg агара (BBE)

Основа питательной среды HiMedia MV805-500G Основа Bacteroides HiVeg агара (BBE) предназначена для селективного выделения, идентификации и культивирования группы Bacteroides fragilis. Применяется для исследования клинических образцов крови, при этом из-за высокой селективности образец рекомендуется параллельно высевать на неселективную среду.

Назначение и область применения

Основа используется для приготовления среды Bacteroides Bile Esculin Agar (BBE) — селективной и дифференциальной среды для предположительной идентификации группы Bacteroides fragilis.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Рекомендуемое применение: селективное выделение, идентификация и культивирование группы Bacteroides fragilis
• Тип образца: клинические образцы, кровь
• Масса: 500 г
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Форма: порошок
• Упаковка: HDPE (полиэтилен высокой плотности)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 61,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое двух флаконов селективной добавки I (Gen Selective Supplement I, FD062).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Кишечные бактероиды являются распространёнными представителями нормальной микрофлоры кишечника и могут вызывать тяжёлые инфекции при нарушении нормального барьера слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта. При попадании в кровоток бактероиды могут переноситься практически в любой орган организма.

Представители группы Bacteroides fragilis устойчивее к антимикробным препаратам, чем большинство других анаэробных микроорганизмов, поэтому для них важны оперативная идентификация и своевременное лечение.

Среда Bacteroides Bile Esculin Agar, разработанная Livingston, Kominos и Yee, применяется как первичная среда для селективного выделения и предположительной идентификации группы Bacteroides fragilis.

Сопутствующие грамотрицательные микроорганизмы могут полностью подавляться благодаря наличию синтетического моющего средства № II и гентамицина, который добавляется в составе селективной добавки. Дифференциальные свойства среды для группы B. fragilis основаны на гидролизе эскулина.

B. fragilis гидролизует содержащийся в среде эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Образовавшийся эскулетин реагирует с цитратом аммония и железа, присутствующим в среде, с образованием коричнево-чёрного комплекса. Комплекс осаждается вокруг колоний и формирует чёрный ореол.

Гидролизат HiVeg® и соевый пептон обеспечивают среду источниками азота и углерода, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Пирофосфат железа поддерживает рост требовательных анаэробных бактерий, включая виды Bacteroides.

Синтетическое моющее средство № II подавляет почти все анаэробные грамотрицательные палочки, за исключением Bacteroides fragilis. Гентамицин подавляет большинство микроорганизмов, кроме эскулин-положительных представителей рода Bacteroides, способных переносить действие синтетического моющего средства № II.

В основе Bacteroides HiVeg® Agar Base (BBE) пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE.

Для организмов группы Bacteroides fragilis требуется минимальная ингибирующая концентрация 80 мкг/мл или выше.

Среду можно непосредственно инокулировать исследуемым образцом. Поскольку среда обладает высокой селективностью, одновременно с ней следует инокулировать неселективную среду.

Представители группы B. fragilis хорошо растут на этой среде. B. vulgatus обычно не гидролизует эскулин, поэтому окрашивание окружающей среды вокруг колоний не наблюдается.

Требования к образцам и обращение

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

При работе с образцами и культурами необходимо:

• ознакомиться с маркировкой до вскрытия контейнера;
• использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица;
• соблюдать правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами;
• выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами;
• при необходимости обращаться к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Для полной идентификации колоний чистых культур требуется проведение дополнительных биохимических тестов.
2. Среда обладает высокой селективностью, поэтому параллельно с этой средой необходимо инокулировать неселективную среду.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция 6,15 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

pH

6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч с добавлением селективной добавки I (FD062).