HiMedia MV776A-100G Основа HiVeg бульона с канамицином, эскулином и азидом

Основа питательной среды HiMedia MV776A-100G Основа HiVeg бульона с канамицином, эскулином и азидом предназначена для приготовления селективного бульона на растительной основе. Применяется для выделения энтерококков из пищевых продуктов; после внесения селективной добавки среду инкубируют при 35 °C или 42 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Основа HiVeg® бульона с канамицином, эскулином и азидом применяется для выделения энтерококков из пищевых продуктов. Среда используется также в методике дип-слайдов для бактериологического мониторинга пищевых продуктов.

MV776A — растительная основа с гидролизатом HiVeg®, заменяющим гидролизат казеина ферментативный в средах на животной основе. Код MV обозначает растительную основу, содержащую гидролизат HiVeg®; код M используется для сред с гидролизатом казеина ферментативным животного происхождения.

Состав

Состав рассчитан и стандартизирован для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Технические характеристики

• Тип продукта: основа питательной среды
• Назначение: выделение энтерококков из пищевых продуктов
• Форма выпуска: сухой порошок
• Масса: 100 г
• Температура: 10–30 °C
• Норма восстановления MV510A: 42,64 г/л
• Норма восстановления MV776A: 32,64 г/л
• Объём приготовленной среды из упаковки 100 г MV510A: 2,34 л
• Объём приготовленной среды из упаковки 100 г MV776A: 3,06 л
• Реакция водного раствора 4,26 % м/о M510A при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2
• Реакция водного раствора 3,27 % м/о M776A при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Среды приготовлены с заменой гидролизата казеина ферментативного на гидролизат HiVeg®, не содержащий рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Среды HiVeg® с канамицином, эскулином и азидом являются модификацией сред с канамицином, эскулином и азидом, разработанных по методике Mossel и соавторов для обнаружения энтерококков в пищевых продуктах.

• Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают энтерококки необходимыми питательными веществами.
• Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами.
• Эскулин и цитрат аммония железа совместно образуют индикаторную систему.
• Энтерококки, гидролизующие эскулин, вызывают почернение среды и образование чёрных зон вокруг колоний.

Восстановление и приготовление среды

1. Взвесьте 21,32 г MV510A или 16,32 г MV776A в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки «Сульфат канамицина» FD146.
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри или пробирки.

Предупреждение по обращению с азидом натрия

Азид натрия может образовывать взрывоопасные азиды металлов при контакте с материалами трубопроводов. Для смыва остатков рекомендуется использовать достаточное количество воды.

Пробоподготовка и схема анализа

1. Добавьте 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого продукта в предварительно охлаждённый разбавитель — триптоновую воду HiVeg® MV463.
2. Приготовьте десятичные разведения образца.
3. Инокулируйте десятичные разведения в основу бульона HiVeg® с канамицином, эскулином и азидом MV776A.
4. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 16–24 ч.
5. При почернении среды выполните пересев штриховым методом на агар MV510A.
6. После инкубации проведите подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: светло-жёлтый, допускается слегка зеленоватый оттенок.

Состояние: однородный, сыпучий порошок без признаков слёживания.

Гелеобразование

Гель должен быть плотным и сопоставимым с 1,0%-ным агаровым гелем MV510A.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета — прозрачный или слегка опалесцирующий. В пробирках образуется прозрачный раствор.

Реакция среды

Водный раствор 4,26 % м/о M510A или 3,27 % м/о M776A имеет при 25 °C значение pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35 °C или 42 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения

• * — характеристики получены при добавлении селективной добавки «Сульфат канамицина» FD146.
• + — почернение среды или образование чёрной зоны вокруг колонии.
• − — отсутствие почернения среды и чёрной зоны вокруг колонии.

Условия хранения и срок годности

• Сухая среда: хранить при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: хранить при температуре 2–8 °C.

Комплект поставки

• Основа HiVeg® бульона с канамицином, эскулином и азидом MV776A — 100 г.

Совместимые компоненты

• Селективная добавка «Сульфат канамицина» FD146.
• Предварительно охлаждённая триптоновая вода HiVeg® MV463.
• Агар HiVeg® с канамицином, эскулином и аз