HiMedia MV766-500G Основа Casman HiVeg бульона

Порошковая основа питательной среды HiMedia MV766-500G Основа Casman HiVeg бульона предназначена для приготовления обогащённой кровью среды и поставляется во флаконе массой 500 г. Применяется для культивирования требовательных микроорганизмов, включая Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae и Haemophilus influenzae, а также для обогащения анаэробных бактерий из пищевых образцов; хранение основы требуется при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение и область применения

Основа Casman HiVeg бульона рекомендована для:

• культивирования требовательных микроорганизмов, особенно Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae и Haemophilus influenzae, после обогащения 5 % стерильной дефибринированной кроличьей кровью;
• обогащения анаэробных бактерий из пищевых образцов.

В составе используются растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Для культивирования требовательных микроорганизмов, таких как Haemophilus и Neisseria, in vitro необходимо добавление факторов роста X и V.

Кровь обеспечивает фактор X (гемин) и фактор V (никотинамид-адениндинуклеотид, NAD), необходимые для роста Haemophilus influenzae. В овечьей крови отсутствует фактор V из-за наличия НАДазы — фермента, разрушающего фактор V. Лошадиная и кроличья кровь обеспечивают оба фактора — X и V — и характеризуются относительно низкой активностью НАДазы, поэтому предпочтительны по сравнению с овечьей кровью.

Никотинамид добавляют в среду для ингибирования нуклеотидазы эритроцитов, которая может разрушать фактор V.

Пептон HiVeg® № 3, гидролизат HiVeg® № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают аминокислоты и другие сложные азотистые питательные вещества. Декстроза улучшает рост патогенных кокков. Кукурузный крахмал препятствует ингибированию роста Neisseria gonorrhoeae жирными кислотами, не влияя на гемолитическую реакцию. Кукурузный крахмал также нейтрализует ингибирующее действие декстрозы.

Среда Casman HiVeg® разработана как замена ранее описанным составам, для которых требовалась трудоёмкая подготовка с использованием свежей и прогретой крови и мясного настоя для обеспечения требовательных микроорганизмов необходимыми питательными веществами.

Среду следует инокулировать сразу после поступления образца в лабораторию.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 29,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 0,15 % об./об. стерильной водолизированной крови, приготовленной в соотношении вода:кровь 3:1 из 5 % стерильной крови.
6. В качестве альтернативы добавьте 5 % частично лизированной крови.
7. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Тип образца

Необходимо добавить образец.

Обращение с образцами и материалами

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор жёлтого цвета.
• После добавления крови: опалесцирующий раствор вишнёво-красного цвета в пробирках.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 2,96 % при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления водолизированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните основу при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта оптимальны при использовании в течение установленного срока годности.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.