HiMedia MV748-100G Модифицированная основа HiVeg среды Эдвардса

Модифицированная основа HiVeg среды Эдвардса HiMedia MV748-100G на растительной основе для селективного выделения Streptococcus agalactiae. Применяется для быстрого выделения стрептококков, вызывающих мастит крупного рогатого скота; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Среда предназначена для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других видов стрептококков, ассоциированных с маститом коров. В качестве образцов используются пробы молока (молочные образцы).

Принцип измерения и интерпретация

Стрептококки представляют собой грамположительные факультативно анаэробные бактерии. Мастит крупного рогатого скота вызывается организмами Streptococcus agalactiae (группа B по Лансфилду).

Для селективного выделения стрептококков в данной среде используются кристаллический фиолетовый и соли таллия, которые подавляют рост большинства сапрофитных бактерий молока.

• HiVeg® пептон и HiVeg® экстракт: источники углерода, азота и других необходимых питательных веществ. Использование растительных компонентов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).
• Эскулин: позволяет дифференцировать эскулин-положительные организмы (стрептококки группы D), которые образуют черные колонии, от эскулин-отрицательных (S. agalactiae), которые образуют бесцветные или голубоватые колонии.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Кристаллический фиолетовый и сульфат таллия: селективные агенты.
• Кровь (добавляется отдельно): обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит индикатором гемолиза. Маститные стрептококки проявляют $\alpha$-, $\beta$- или $\gamma$-тип гемолиза.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 41,33 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 115 °C в течение 20 минут (давление $\approx 0,07$ МПа).
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–7 % (об./об.) стерильной дефибринированной крови быка или овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

Центрифугированный образец молока инокулируют непосредственно на поверхность поверхности агара. Эскулин-отрицательные (бесцветные или голубые) колонии S. agalactiae подвергают дальнейшему субкультивированию для проведения идентификационных тестов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение: растительное (Animal Free)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Цвет и прозрачность основы: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Цвет после добавления крови: вишнево-красный непрозрачный гель
• Реакция 4,13 % (м/об) водного раствора при 25 °C: pH 7,4 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 5–7 % (об./об.) стерильной дефибринированной крови овцы после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы после использования должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.