HiMedia MV748-100G Модифицированная основа HiVeg среды Эдвардса

Порошкообразная питательная среда HiMedia MV748-100G Модифицированная основа HiVeg среды Эдвардса — основа для приготовления селективной кровяной среды, масса упаковки 100 г. Применяется для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота; готовую среду используют с добавлением 5–7 % стерильной дефибринированной крови крупного рогатого скота или овцы.

Назначение и область применения

Основа предназначена для приготовления селективной среды Эдвардса с добавлением крови. Среда используется для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота.

Тип образца: молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 41,33 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 20 мин. Указанный режим соответствует давлению 10 фунтов, ориентировочно ≈0,069 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови крупного рогатого скота или овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки являются грамположительными факультативно-анаэробными бактериями, входящими в состав нормальной сопутствующей микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки группы B могут вызывать системные инфекции у младенцев и иногда бактериальный эндокардит.

Мастит — заболевание крупного рогатого скота, вызываемое, в частности, Streptococcus agalactiae. Streptococcus agalactiae относится к стрептококкам группы B по классификации Лэнсфилд.

Наиболее распространённые селективные агенты для выделения стрептококков — кристаллический фиолетовый и соли таллия. Среду с кристаллическим фиолетовым применяли для выделения кожных стрептококков. Позднее было установлено, что стрептококки из молока способны расти на кровяном агаре с генциановым фиолетовым, тогда как другие сапрофитные бактерии молока на этой среде подавляются. Для выделения возбудителя мастита применяли кровяной агар с эскулином и кристаллическим фиолетовым. Для той же цели использовали аналогичную среду, содержащую ацетат таллия.

В модифицированной основе среды Эдвардса HiVeg® пептоны животного происхождения заменены растительными пептонами. HiVeg® пептон и экстракт HiVeg® служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ.

Эскулин позволяет дифференцировать эскулин-положительные организмы, включая стрептококки группы D, и эскулин-отрицательные организмы, включая Streptococcus agalactiae. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Кристаллический фиолетовый и сульфат таллия действуют как селективные агенты для стрептококков. Добавление крови обеспечивает дополнительные питательные вещества и одновременно служит индикатором гемолиза.

Стрептококки, вызывающие мастит, демонстрируют альфа-, бета- или гамма-гемолиз. Эскулин позволяет отличать эскулин-положительные стрептококки группы D, образующие чёрные колонии, от эскулин-отрицательных Streptococcus agalactiae, образующих синие или бесцветные колонии.

Центрифугированный образец исследуемого молока непосредственно наносят на поверхность чашки со средой. Эскулин-отрицательные организмы Streptococcus agalactiae, образующие синие или бесцветные колонии, дополнительно пересевают для проведения идентификационных тестов.

Замена пептонов животного происхождения растительными компонентами HiVeg® обеспечивает отсутствие рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Подготовка и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 4,13 % при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Допустимый диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами. При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.