HiMedia MV742-100G L.D. HiVeg агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MV742-100G L.D. HiVeg агар предназначена для культивирования и идентификации требовательных анаэробных бактерий и содержит 20,000 г/л агара. Среда применяется для оценки степени роста анаэробов, а также определения продукции индола и каталазы у видов Bacteroides и Fusobacterium; каталазоположительная реакция может проявляться с задержкой до 30 с – 1 мин после нанесения 3 % пероксида водорода.

Назначение

Среда L.D. (Lombard–Dowell) рекомендована для культивирования и идентификации требовательных анаэробных бактерий. L.D. агар применяют для:

• оценки степени роста анаэробных микроорганизмов;
• определения продукции индола у видов Bacteroides и Fusobacterium;
• определения продукции каталазы у видов Bacteroides и Fusobacterium.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Микроорганизмы, способные расти в отсутствие кислорода, относятся к анаэробам. По способности переносить кислород анаэробы подразделяют на факультативные и облигатные.

Анаэробные грамотрицательные бактерии входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, ротовой полости, кишечного и мочеполового тракта человека и животных. Наиболее часто в клинических образцах выявляют устойчивую к желчи группу Bacteroides fragilis; эта группа более устойчива к противомикробным препаратам, чем другие анаэробы. Fusobacterium necrophorum — вирулентный анаэроб, способный вызывать тяжёлые инфекции, обычно у детей и молодых людей.

Среда L.D. разработана Dowell и Lombard для культивирования и идентификации требовательных анаэробных бактерий. L.D. агар представляет собой агар на основе переваренного казеина, обогащённый гемином, витамином K1, L-цистином и дрожжевым экстрактом.

В L.D. HiVeg® агар пептоны животного происхождения заменены растительными пептонами, поэтому среда не связана с рисками BSE/TSE. Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества, пирофосфат железа и витамин K1 — дополнительные факторы роста, L-цистин и L-триптофан служат источниками аминокислот, сульфит натрия выполняет функцию антиоксиданта, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

Каталазоположительная реакция может быть неочевидной в течение 30 с – 1 мин после нанесения 3 % пероксида водорода.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,22 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Тип образца производителем не указан.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,32 % масс./об. при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Ограничения метода

• Каталазоположительная реакция может быть неочевидной в течение 30 с – 1 мин после нанесения 3 % пероксида водорода.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте контейнер и храните продукт в сухом виде.
• Порошок гигроскопичен; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы и материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Технические характеристики

Отличие состава

В L.D. HiVeg® агаре пептоны животного происхождения заменены растительными пептонами; гидролизат HiVeg® используется совместно с дрожжевым экстрактом, витамином K1, пирофосфатом железа, L-цистином и L-триптофаном для обеспечения роста требовательных анаэробных бактерий.