HiMedia MV741-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК

Основа питательной среды HiMedia MV741-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК — порошковая среда с концентрацией при восстановлении 40,0 г/л и конечным pH 7,3 ± 0,2. Основа предназначена для выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов, особенно стафилококков, с добавлением ДНК, бромтимолового синего и маннита.

Назначение

Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК с добавкой ДНК применяется для выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов, особенно для идентификации патогенных стафилококков.

Состав

Количество компонентов указано в граммах на литр:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Профиль продукта

• Рекомендуемое применение: выявление активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов.
• Восстановление: 40,0 г/л.
• Объём приготовленной среды:
  • из 500 г: 12,5 л;
  • из 100 г: 2,5 л.
• pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Добавки: ДНК, бромтимоловый синий и маннит.
• Стерилизация: 118–121 °C, 15 мин.
• Форма выпуска: порошок.
• Тип продукта: HiVeg™.
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа.
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 500 г.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40 г основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита.
3. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 12–15 фунтов (примерно 0,083–0,103 МПа) и температуре 118–121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду и разлейте по чашкам Петри.

Принцип действия и интерпретация

Среда изготовлена с использованием гидролизата HiVeg®, не содержащего рисков BSE/TSE, связанных с компонентами животного происхождения. Основа агара для теста на ДНКазу HiVeg представляет собой модификацию основы агара для теста на ДНКазу, применяемой для выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов, особенно для идентификации патогенных стафилококков.

Активность ДНКазы была выявлена Векманом и Кэтлином у микрококков; исследователи установили корреляцию с активностью коагулазы, поскольку коагулазоположительные виды были ДНКазоположительными. Ди Сальво подтвердил результаты Векмана и Кэтлина и отметил точную корреляцию активности ДНКазы и коагулазы. В эксперименте Ди Сальво для активации фермента ДНКазы в среду были внесены ДНК и хлорид кальция.

Среда для определения ДНКазы была модифицирована Шрайером добавлением толуидинового синего. В основу агара для теста на ДНКазу HiVeg без ДНК вместо толуидинового синего добавлен бромтимоловый синий. Модифицированная среда обеспечила более быструю идентификацию Serratia marcescens и позволила дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Гидролизат HiVeg® и папаиновый перевар соевой муки обеспечивают среду необходимыми питательными веществами. ДНКаза деполимеризует ДНК, в результате чего вокруг зоны роста микроорганизмов образуется прозрачная зона. Зону визуализируют после заливания поверхности чашки соляной кислотой.

При добавлении бромтимолового синего непосредственно в среду активность ДНКазы проявляется реакцией от бесцветной до жёлтой. Для окончательной идентификации следует выполнять дополнительные подтверждающие тесты.

Физические и химические характеристики

Внешний вид порошка

Однородный, сыпучий порошок светло-жёлтого цвета; может иметь лёгкий зеленоватый оттенок.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета. После добавления 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита в чашках Петри образуется гель желтовато-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,0%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Расшифровка:

• • — агар для теста на ДНКазу HiVeg® с бромтимоловым синим.
• • — жёлтая зона вокруг роста.
• − — отсутствие изменения цвета вокруг роста.

Условия хранения

• Сухая среда: при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: при температуре 2–8 °C.

Техническое отличие состава

В растительной основе MV741 используется гидролизат HiVeg®, тогда как соответствующая среда на животной основе M741 содержит ферментативный гидролизат казеина.