HiMedia MV741-100G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК

Основа питательной среды HiMedia MV741-100G «Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК» — порошковый препарат для выявления активности дезоксирибонуклеазы у бактерий и грибов, особенно стафилококков. Применяется в микробиологических исследованиях после добавления ДНК, бромтимолового синего и маннита; конечный pH среды при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.

Назначение

Основа агара HiVeg для теста на ДНКазу без ДНК с добавками ДНК предназначена для выявления активности дезоксирибонуклеазы у бактерий и грибов, особенно у стафилококков.

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Профиль продукта

• Рекомендуемое применение: выявление активности дезоксирибонуклеазы у бактерий и грибов.
• Восстановление: 40,0 г/л.
• Объём приготовленной среды:
  • из упаковки 500 г: 12,5 л;
  • из упаковки 100 г: 2,5 л.
• pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Добавки: ДНК, бромтимоловый синий и маннит.
• Стерилизация: 118–121 °C, 15 мин.

Технические характеристики

• Наименование: основа HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК.
• Артикул: MV741-100G.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа.
• Тип продукта: HiVeg™.
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 100 г.
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Рабочий температурный диапазон, указанный для товара: 10–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Концентрация при приготовлении: 40,0 г/л.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита.
3. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 12–15 фунтов (примерно 0,083–0,103 МПа) и температуре 118–121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду и разлейте в чашки.

Принцип действия и интерпретация

Основа содержит гидролизат HiVeg®, не содержащий компонентов животного происхождения, и предназначена для выявления активности дезоксирибонуклеазы у бактерий и грибов, в частности для идентификации патогенных стафилококков.

Дезоксирибонуклеаза деполимеризует ДНК. В результате вокруг зоны микробного роста образуется прозрачная зона, которую визуализируют затоплением чашки соляной кислотой. При добавлении в среду бромтимолового синего активность дезоксирибонуклеазы проявляется реакцией от бесцветной до жёлтой.

Активность дезоксирибонуклеазы у микрококков была описана Weckman и Catlin; также была установлена корреляция с коагулазной активностью: коагулазоположительные виды являлись ДНКазоположительными. Di Salvo подтвердил результаты Weckman и Catlin и наблюдал точную корреляцию активности ДНКазы и коагулазы. В его эксперименте для активации фермента ДНКазы в среду добавляли ДНК и хлорид кальция.

Позднее среда для определения ДНКазы была модифицирована добавлением толуидинового синего. В основе HiVeg агара для теста на ДНКазу без ДНК толуидиновый синий заменён бромтимоловым синим. Модифицированная среда позволяет быстрее идентифицировать Serratia marcescens и дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Гидролизат HiVeg® и папаиновый перевар соевой муки обеспечивают среду необходимыми питательными веществами. Для окончательной идентификации следует проводить дополнительные подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Светло-жёлтый однородный сыпучий порошок, может иметь лёгкий зеленоватый оттенок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

После добавления 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита гель в чашках Петри приобретает желтовато-зелёный цвет.

Реакция

Реакция 4,0%-ного водного раствора составляет pH 7,3 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Расшифровка:

• • — агар HiVeg для теста на ДНКазу с бромтимоловым синим.
• • — жёлтая зона вокруг роста.
• − — отсутствие изменения цвета вокруг роста.

Условия хранения и эксплуатации

• Сухую среду хранить при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Приготовление проводить с использованием дистиллированной воды.
• Стерилизацию выполнять автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин.
• Перед применением приготовленную среду необходимо охладить и разлить в чашки Петри.