HiMedia MV658-500G Основа KG HiVeg агара

Основа агара Ким-Гепферта HiVeg HiMedia MV658-500G на растительной основе. Применяется для стимуляции быстрого и свободного спорообразования Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию агара Ким-Гепферта, в которой пептический digested животного происхождения заменён на растительный пептон HiVeg®, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Состав разработан для обеспечения свободного формирования спор Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis в течение 20–24 часов.

Пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт поддерживают рост и выработку лецитиназы Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis. Bacillus polymyxa не способна вырабатывать лецитиназу в условиях ограниченного содержания питательных веществ. Активность лецитиназы проявляется в виде опалесцирующей (матовой) зоны вокруг отдельной колонии. Bacillus cereus устойчив к полимиксину B, в то время как рост грамотрицательных организмов подавляется данным антибиотиком. Разграничение Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis осуществляется путём микроскопического исследования: у последних в спорулированных клетках обнаруживаются кристаллы эндотоксина.

Методика приготовления и анализа

1. Суспендируйте 19,53 г порошка в 900 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) и восстановленный селективный добавок полимиксина B (FD003).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Вес: 500 г
• Концентрация при приготовлении: 19,53 г/л
• Объем готовой среды из 500 г: 25,6 л
• pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Условия хранения (сухая среда): ниже 30 °C
• Условия хранения (готовая среда): 2–8 °C

Дополнительные спецификации

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок светло-розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,8% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: оранжевая прозрачная базовая среда; после добавления эмульсии яичного желтка (FD045) и сульфата полимиксина B (FD003) образует оранжевый опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 1,95% (масса/объем) водного раствора составляет 6,8 $\pm$ 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 30–35 °C в течение 24 часов с добавлением стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) и селективной добавки полимиксина B (FD003).

Примечание: «+» означает наличие опалесцирующей зоны вокруг колонии.

Совместимость и добавки

Для полноценного функционирования среды требуются следующие добавки:

• Селективная добавка полимиксина B (Polymyxin B Selective Supplement, FD003).
• Эмульсия яичного желтка (Egg Yolk Emulsion, FD045).