HiMedia MV646-500G Основа кровяного агара с активированным углем, HiVeg

Сухая питательная среда (основа кровяного агара) HiMedia MV646-500G Основа кровяного агара с активированным углем, HiVeg, — порошковая среда с конечным значением pH 7,5 ± 0,2. Предназначена для культивирования и выделения Bordetella pertussis и Haemophilus influenzae; для приготовления среды требуется добавление дефибринированной крови лошади и селективных добавок.

Назначение

Основа кровяного агара с активированным углем, HiVeg, применяется для:

• культивирования и выделения Bordetella pertussis;
• культивирования и выделения Haemophilus influenzae на среде с добавлением крови лошади;
• получения культур Bordetella pertussis для производства вакцин;
• поддержания запасных культур Bordetella pertussis на скошенной поверхности среды с еженедельными пересевами.

Среда с активированным углем может использоваться как замена агару Борде—Жангу для выделения Bordetella pertussis и производства вакцин.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV646-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Диапазон pH: 7,30–7,70
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 54,5 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. На каждые 100 мл среды добавьте:
   • 10 мл стерильной дефибринированной крови лошади;
   • 0,3 мл стерильного раствора пенициллина концентрацией 100 ЕД/мл;
   • 0,3 мл 0,1%-ного раствора 4:4-диамидино-дифениламина гидрохлорида.

Перед разливом осторожно вращайте колбы, чтобы получить равномерную суспензию активированного угля: активированный уголь склонен оседать на дно колбы.

Принцип действия и интерпретация

Род Bordetella включает четыре вида: Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica и Bordetella avium. Генетические исследования показывают близкое родство этих микроорганизмов.

Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis используют человека как единственного хозяина. Bordetella bronchiseptica встречается у широкого круга животных и иногда выявляется у человека. Bordetella avium обнаруживается у птиц.

Виды Bordetella являются облигатными аэробами и характеризуются низкой метаболической активностью. Микроорганизмы неподвижны, за исключением Bordetella bronchiseptica. Bordetella pertussis является основной причиной коклюша, а Bordetella parapertussis связана с более лёгкой формой заболевания.

Для первичного выделения Bordetella pertussis, в частности, требуется добавление активированного угля и 15–20 % крови для нейтрализации ингибирующих рост факторов. Выделение этого микроорганизма требует обогащающей среды.

Активированный уголь и растворимый крахмал нейтрализуют токсичные для видов Bordetella вещества, включая жирные кислоты. Пептон HiVeg®, экстракт HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Для подавления сопутствующей носоглоточной микрофлоры в среду добавляют пенициллин. Флора, устойчивая к пенициллину, может вызывать загрязнение культуры. Для повышения селективности среды пенициллин дополняют диамидино-дифениламином дигидрохлоридом.

Метициллин подавляет нежелательную носоглоточную флору эффективнее пенициллина. Цефалексин может быть эффективнее метициллина; цефалексин добавляют для ингибирования контаминирующих грамположительных микроорганизмов, присутствующих в образце.

Среда половинной концентрации с цефалексином может использоваться как селективная обогащающая транспортная среда. Следует инокулировать одновременно неселективную и селективную среды, поскольку некоторые штаммы Bordetella pertussis могут испытывать небольшое ингибирование под действием цефалексина.

Использование растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения позволяет получить среду без рисков, связанных с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми