HiMedia MV646-500G Основа кровяного агара с активированным углем, HiVeg

Сухая основа кровяного агара с активированным углем HiMedia MV646-500G HiVeg для культивирования и изоляции Bordetella pertussis и Haemophilus influenzae. Используется для выделения возбудителей коклюша и производства соответствующих вакцин; содержит растительные пептоны (HiVeg), что исключает риски BSE/TSE.

Принцип измерения и интерпретация

Среда подготовлена по методу Mishulow, Sharpe и Cohen. Она служит альтернативой агару Борде-Женгу для изоляции B. pertussis.

Особенности состава и их функции:

• Активированный уголь и растворимый крахмал: нейтрализуют токсичные для видов Bordetella вещества, такие как жирные кислоты.
• HiVeg-пептон, HiVeg-экстракт и дрожжевой экстракт: обеспечивают необходимый набор питательных веществ.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Пенициллин и диамидо-дифениламин дигидрохлорид: добавляются в качестве антимикробных агентов для подавления сопутствующей назофарингеальной флоры, которая может ингибировать рост целевых микроорганизмов при длительной инкубации.

Среда может использоваться для поддержания стоковых культур Bordetella pertussis на скошенных частях (скосах) с еженедельным пересевом.

Методика приготовления и использования

1. Растворение: суспендируйте 54,5 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрев: нагрейте до кипения при постоянном перемешивании до полного растворения.
3. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охлаждение: охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавки: на каждые 100 мл среды добавьте:
   • 10 мл стерильной дефибринированной крови лошади;
   • 0,3 мл стерильного раствора пенициллина (100 ед/мл);
   • 0,3 мл 0,1 % раствора 4:4 диамидо-дифениламин гидрохлорида.

Важное примечание: уголь имеет тенденцию оседать на дно колбы. Перед разливом аккуратно перемешайте содержимое колбы круговыми движениями для получения однородной суспензии.

Технические характеристики

Физические свойства и контроль качества

• Внешний вид: серый или серовато-черный гомогенный свободнотекущий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: черный непрозрачный гель с нерастворенными черными частицами (в чашках Петри).
• Реакция (pH): 7,5 $\pm$ 0,2 при 25 °C (диапазон 7,30–7,70).

Общие параметры

• Происхождение: без компонентов животного происхождения (растительный/Veg).
• Тип продукта: HiVeg™.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: ПЭНП (HDPE).
• Вес: 500 г.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением стерильной дефибринированной крови, раствора пенициллина (100 ед/мл) и 0,1 % раствора 4:4 диамидо-дифениламин гидрохлорида после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Состав (г/л)

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• При разливке среды необходимо осторожно перемешать колбу для обеспечения равномерного распределения угля.
• Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Работа с образцами должна проводиться в соответствии с установленными руководствами по микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.