Питательная агаризованная среда HiMedia HiMedia MV640-100G HiVeg агар с розовым бенгальским и хлорамфениколом для селективного выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов. HiMedia MV640-100G применяется для анализа пищевых продуктов, объектов окружающей среды и других образцов; среда чувствительна к свету, поскольку фотодеградация розового бенгальского образует соединения, токсичные для грибов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов из пищевых продуктов, объектов окружающей среды и других образцов.

• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав рассчитан и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 32,15 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар HiVeg® с розовым бенгальским и хлорамфениколом приготовлен с использованием пептона HiVeg® № 4 вместо микологического пептона. Это позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Среда представляет собой модификацию агара с розовым бенгальским и хлорамфениколом, первоначально разработанного Jarvis (1) и позднее модифицированного Overcast и Weakley (2). Применение розового бенгальского в средах с нейтральным pH описано Smith и Dawson (3).

Пептон HiVeg® № 4 обеспечивает источник углерода, азотистые вещества, аминокислоты с длинной цепью, витамины и другие необходимые для роста питательные вещества. Декстроза служит источником энергии. Хлорамфеникол оказывает ингибирующее действие на грамотрицательные бактерии. Краситель розовый бенгальский подавляет развитие бактерий и уменьшает расползание плесневых грибов, контролируя размер и высоту колоний, в том числе колоний видов Rhizopus (4).

Нейтральный pH среды в сочетании с антибиотиками имеет преимущества для применения по назначению (5, 6). Розовый бенгальский поглощается колониями плесневых грибов и дрожжей, что способствует их количественному определению (1).

Количество дрожжей или плесневых грибов в 1 г или 1 мл исследуемого образца рассчитывают умножением числа колоний на коэффициент разведения. Бактерии и дрожжи могут иметь сходный внешний вид, поэтому колонии следует исследовать микроскопически.

Из-за селективных свойств среды и типа культивируемого образца некоторые штаммы грибов могут плохо расти или не расти на полностью приготовленной среде. Аналогично, некоторые штаммы бактерий могут не подавляться либо подавляться только частично.

Типы образцов

• Пищевые продукты
• Образцы окружающей среды

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам (7).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среду нельзя подвергать воздействию света, поскольку фотодеградация розового бенгальского приводит к образованию соединений, токсичных для грибов.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,55%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-розового цвета.
• Реакция: реакция 3,22%-ного водного раствора масс./об. при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 25–30 °C в течение 5 суток.

• Ранее вид был известен как Aspergillus niger.

• ** Ранее вид был известен как Bacillus subtilis subsp. spizizeni.
• • Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните сухую и приготовленную среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Соблюдайте установленные лабораторные процедуры при утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики