HiMedia MV576-500G Основа RS HiVeg среды

Компонент питательной среды HiMedia MV576-500G Основа RS HiVeg среды предназначен для селективного выделения, культивирования и предположительной идентификации Aeromonas hydrophila. Основа применяется для анализа пищевых продуктов и воды, при этом готовую среду не автоклавируют, а используют с селективной добавкой № 5 (FD096).

Назначение

Основа RS HiVeg среды рекомендована для селективного выделения, культивирования и предположительной идентификации Aeromonas hydrophila. Типы исследуемых образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами.

Принцип действия и интерпретация

Среда RS разработана Римлером и Шоттсом на основе принципа ксилозо-лизиновых агаровых сред. Среда используется для селективного выделения и предположительной идентификации Aeromonas hydrophila и других грамотрицательных бактерий с учётом следующих признаков:

• декарбоксилирование лизина и орнитина;
• ферментация мальтозы;
• образование H₂S.

Дрожжевой экстракт служит источником питательных веществ. Тиосульфат натрия, гидрохлорид L-цистеина и цитрат аммонийного железа используются как индикаторная система образования H₂S.

Мальтоза входит в состав среды и ферментируется большинством представителей рода Aeromonas. Ферментацию мальтозы выявляют по изменению окраски бромтимолового синего.

Синтетическое моющее средство № III и новобиоцин подавляют рост грамположительных бактерий и бактерий рода Vibrio. Citrobacter freundii обычно образует H₂S, однако встречаются штаммы с отрицательной реакцией.

L-цистеин и L-орнитин часто декарбоксилируются энтеробактериями с образованием щелочных продуктов. Штаммы Aeromonas, положительные по лизину и орнитину, могут не формировать характерную интенсивно-жёлтую окраску из-за образования щелочных продуктов при декарбоксилировании аминокислот.

Результаты интерпретируют в течение 24 ч: после 26 ч происходит медленная реверсия жёлтой окраски в основную зелёную окраску.

Среду инкубируют при 35 °C. Такая температура исключает возможный рост Aeromonas salmonicida, который может развиваться при пониженных температурах и приводить к ложноположительной реакции.

Для исключения бактерий рода Citrobacter жёлтые колонии с чёрными центрами или без них проверяют на оксидазную реакцию.

Proteus mirabilis на этой среде подавляется.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,43 г основы в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную основу.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки № 5 (FD096).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки № 5 (FD096) и инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Proteus hauseri ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,35 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-зелёного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,54 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,80–7,20.
• Конечный pH: 7,0 ± 0,2.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяют соответствующие методики отбора и обработки проб.

Для образцов воды применяют соответствующие методики отбора и обработки проб с учётом местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Необходимо использовать чистую изолированную культуру.
2. Результаты интерпретируют в течение 24 ч, поскольку после 26 ч возможна медленная реверсия жёлтой окраски в основную зелёную окраску.
3. Для исключения ложноположительного результата среду следует инкубировать при 35 °C, поскольку Aeromonas salmonicida может расти при пониженных температурах.
4. Для подтверждения принадлежности жёлтых колоний, в том числе колоний с чёрными центрами, проводят оксидазный тест для исключения Citrobacter.
5. Результаты для штаммов Aeromonas, положительных по лизину и орнитину, следует интерпретировать с учётом возможного ослабления жёлтой окраски из-за образования щелочных продуктов декарбоксилирования аминокислот.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения основы: 10–30 °C.
• Условия хранения основы: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия основу необходимо хранить в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В основе RS HiVeg среды пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами; физическая форма продукта — порошок, упаковка выполнена из полиэтилена высокой плотности.

Совместимые компоненты

• Селективная добавка № 5 (FD096): регидратированное содержимое одного флакона добавляют в охлаждённую до 45–50 °C основу перед разливом в чашки Петри.