HiMedia MV574-500G Инозитол-бриллиантовый зеленый HiVeg агар

Питательная селективно-дифференциальная агаровая среда HiMedia MV574-500G Инозитол-бриллиантовый зеленый HiVeg агар с конечным pH 7,2 ± 0,2. Среда предназначена для селективного выделения Plesiomonas shigelloides и видов Aeromonas из пищевых продуктов и воды; ограничение применения — возможная недостаточная поддержка роста требовательных микроорганизмов.

Назначение

HiMedia MV574-500G рекомендуется для селективного выделения Plesiomonas shigelloides и видов Aeromonas. Типы исследуемых образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Состав, г/л:

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Plesiomonas shigelloides является условно-патогенным микроорганизмом. Бактерия была впервые выделена Фергюсоном и Хендерсоном в 1947 году на агаре МакКонки из фекального образца. P. shigelloides выделяют из пресной воды, пресноводной рыбы, моллюсков и различных видов животных.

Инфицирование человека P. shigelloides преимущественно связано с водой. Микроорганизм может присутствовать в санитарно неблагополучной воде, используемой для питья, рекреационных целей или промывания пищевых продуктов, употребляемых без последующего приготовления или нагревания. P. shigelloides связывают с возникновением гастроэнтерита. Значение микроорганизма как кишечного патогена предполагается из-за его преимущественного выделения из образцов кала пациентов с диареей. Идентификацию проводят с использованием общепринятых бактериологических методов, серотипирования и определения чувствительности к антибиотикам.

Другими возбудителями водных диарей у человека могут быть виды Aeromonas. Агаровая среда «Инозитол — бриллиантовый зелёный — жёлчные соли» описана Шубертом и рекомендована для селективного выделения P. shigelloides — условно-патогенного микроорганизма — и видов Aeromonas из фекалий и других пищевых продуктов.

Для селективного выделения P. shigelloides разработано несколько питательных сред и методик. Штаммы P. shigelloides растут в присутствии бриллиантового зелёного и устойчивы к жёлчным солям, которые обычно вводят в состав сред для подавления грамположительных бактерий. Большинство видов бактерий не ферментирует мезо-инозитол, тогда как почти все штаммы P. shigelloides ферментируют мезо-инозитол с образованием природного циклического многоатомного спирта. Шуберт использовал эти три свойства при разработке среды «Инозитол — бриллиантовый зелёный HiVeg® агар», также обозначаемой как дифференциальный HiVeg® агар для Plesiomonas.

Среда является дифференциальной для микроорганизмов, утилизирующих и не утилизирующих инозитол. Животные пептоны полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Пептон HiVeg® № 3 и экстракт HiVeg® № 1 обеспечивают микроорганизмы азотистыми питательными веществами, необходимыми для роста. Синтетическое моющее вещество № 1 и бриллиантовый зелёный подавляют соответственно все грамположительные бактерии и большинство грамотрицательных палочек, за исключением колиформиых микроорганизмов. Мезо-инозитол служит ферментируемым углеводным источником, а нейтральный красный — индикатором pH.

Plesiomonas может быть ошибочно идентифицирована как представитель семейства Enterobacteriaceae, если при идентификации не выполняется оксидазный тест.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 52,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика работы с образцами

В зависимости от консистенции образца и предполагаемого количества микроорганизмов образцы разводят и непосредственно высевают штриховым методом на PL HiVeg® агар (MV1173) и дифференциальный HiVeg® агар для Plesiomonas (MV574).

Дополнительно 10 г образца инокулируют в 90 мл основы тетратионатного бульона HiVeg® без йода и бриллиантового зелёного (MV032). Чашки инкубируют при 35–37 °C, бульон — при 40 °C.

После инкубации в течение 24 ч предположительно положительные колонии P. shigelloides пересевают на трёхсахарный железный HiVeg® агар (MV021) и среду «Инозитол-желатин» в пробирках (M1161). Культуру из MV032 пересевают штриховым методом на PL HiVeg® агар (MV1173) и агаровую среду «Инозитол — бриллиантовый зелёный HiVeg®» — дифференциальный HiVeg® агар для Plesiomonas (MV574).

Тип образцов и обращение с ними

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Рабочие характеристики и контроль качества

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 5,2 % (масса/объём) при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии |