HiMedia MV560A-500G Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара с 1% агара

Обезвоженная питательная среда HiMedia MV560A-500G Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара с 1% агара производства HiMedia предназначена для приготовления селективной кровяной среды и содержит колистина сульфат и налидиксовую кислоту. Среда применяется для селективного выделения патогенных грамположительных кокков из различных образцов, включая молочные продукты и воду; рабочую среду готовят с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови.

Назначение

Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара с 1 % агара рекомендована для селективного выделения патогенных грамположительных кокков из различных образцов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 39,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Основа агара Columbia представляет собой питательную формулу, предназначенную для приготовления среды с 5 % дефибринированной крови. Кровь обеспечивает дополнительные питательные вещества и позволяет выявлять гемолитические реакции.

Среда Columbia Blood Agar Base используется как основа для приготовления кровяных питательных сред, а также селективных сред с различными комбинациями антимикробных добавок. Эллнер и соавторы разработали эту среду и установили, что используемая комбинация пептонов обеспечивает более быстрый и обильный рост стрептококков, стафилококков, Neisseria и Haemophilus с более чётко выраженными гемолитическими реакциями.

Основа Columbia C.N.A. HiVeg® агара с 1 % агара имеет ту же формулу, что и основа агара Columbia, с добавлением 10 мг/л колистина и 15 мг/л налидиксовой кислоты. Эти компоненты подавляют рост грамотрицательных бактерий и поддерживают рост стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков при добавлении 5 % крови.

В составе основы животные пептоны полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE). Пептон HiVeg® № 5 и настой HiVeg® обеспечивают обильный рост микроорганизмов и визуализацию выраженных гемолитических реакций.

Овечья кровь позволяет выявлять гемолитические реакции и обеспечивает фактор X, необходимый для роста многих видов бактерий. Лошадиная кровь поставляет факторы X и V, поэтому в большинстве лабораторий ей обычно отдают предпочтение. Дрожжевой экстракт служит источником энергии, а кукурузный крахмал — нейтрализующим компонентом.

Среда имеет относительно высокое содержание углеводов. Поэтому β-гемолитические стрептококки могут формировать зеленоватую зону гемолиза, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз.

Добавление колистина или полимиксина B и налидиксовой кислоты делает среду селективной для грамположительных микроорганизмов. Колистин и налидиксовая кислота нарушают клеточную мембрану грамотрицательных организмов, при этом налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК у чувствительных грамотрицательных бактерий.

Основа Columbia C.N.A. HiVeg® агара с 1 % агара после добавления крови применяется для селективного выделения грамположительных кокков, стафилококков и стрептококков, особенно при наличии грамотрицательных палочек, способных перерастать на обычных кровяных агарах. Среда также используется для селективного выделения Gardnerella vaginalis.

Без добавления крови среда поддерживает рост Brucella abortus, Yersinina pestis, Clostridium perfringens и всех обычно встречающихся представителей семейства Enterobacteriaceae.

Тип образцов

• Молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: жёлтая.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: вишнёво-красная.
• Основная среда: прозрачная или слегка опалесцирующая.
• После добавления крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель.

Реакция

Реакция водного раствора с массовой долей 4,4 % при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.