HiMedia MV560-500G Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара

Основа питательной среды HiMedia MV560-500G Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара — порошковая среда HiMedia с добавлением колистина и налидиксовой кислоты для селективного культивирования грамположительных кокков. Применяется для выделения патогенных стафилококков, стрептококков и других грамположительных микроорганизмов из молочных и водных образцов; хранение обезвоженной и приготовленной среды — при 2–8 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения патогенных грамположительных кокков из различных образцов.

Тип образцов:

• молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 44,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Основа агара Columbia представляет собой богатую питательную формулу, которая после добавления 5 % дефибринированной крови обеспечивает дополнительное питание и возможность выявления гемолитических реакций.

Основа кровяного агара Columbia используется для приготовления сред с кровью, а также селективных сред, в которые в качестве добавок вводят различные комбинации антимикробных веществ. Комбинация пептонов в формуле обеспечивает более быстрый и обильный рост Streptococci, Staphylococci, Neisseria и Haemophilus с более чётко выраженными гемолитическими реакциями.

Основа агара Columbia C.N.A. HiVeg®™ приготовлена по той же формуле, что и основа агара Columbia, но дополнительно содержит 10 мг/л колистина и 15 мг/л налидиксовой кислоты. Эти компоненты подавляют рост грамотрицательных бактерий и поддерживают рост стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков после добавления 5 % крови.

В продукте пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Пептон HiVeg®™ № 5 и настой HiVeg®™ поддерживают обильный рост микроорганизмов и визуализацию выраженных гемолитических реакций.

• Овечья кровь позволяет выявлять гемолитические реакции и поставляет X-фактор, необходимый для роста многих видов бактерий.
• Лошадиная кровь поставляет X-фактор и V-фактор, поэтому в большинстве лабораторий ей отдают предпочтение.
• Дрожжевой экстракт служит источником энергии.
• Кукурузный крахмал выполняет функцию нейтрализатора.

Среда содержит относительно большое количество углеводов. Поэтому β-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз.

Добавление колистина или полимиксина B и налидиксовой кислоты делает среду селективной для грамположительных микроорганизмов. Колистин и налидиксовая кислота нарушают клеточную мембрану грамотрицательных организмов, а налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК у чувствительных грамотрицательных бактерий.

Основа агара Columbia C.N.A. HiVeg®™ с добавлением крови обеспечивает селективное выделение грамположительных кокков, стафилококков и стрептококков, особенно при наличии грамотрицательных палочек, склонных к избыточному росту на обычных чашках с кровяным агаром. Среда также применяется для селективного выделения Gardnerella vaginalis.

Без добавления крови среда поддерживает рост Brucella abortus, Yersinia pestis, Clostridium perfringens и всех распространённых представителей семейства Enterobacteriaceae.

Сбор и обработка образцов

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• При необходимости обращайтесь к паспортам безопасности для конкретных материалов.

Ограничения применения

1. Некоторые штаммы β-гемолитических стрептококков образуют зоны гемолиза на агаре Columbia C.N.A. Все такие штаммы стрептококков рекомендуется пересевать на кровяной агар (M073) для дальнейшей идентификации.
2. Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,4%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните обезвоженный порошок и приготовленную среду при 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер.

Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие

В основе Columbia C.N.A. HiVeg®™ пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами HiVeg®™, а селективность для грамположительных микроорганизмов обеспечивается сочетанием колистина и налидиксовой кислоты.