HiMedia MV560-500G Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара

Основа Columbia C.N.A. HiVeg агара HiMedia MV560-500G для селективного выделения патогенных грамположительных кокков из различных образцов. Применяется для подавления роста грамотрицательных бактерий и поддержки роста стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков при добавлении 5 % крови.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию питательного агара Колумбия, в состав которой добавлены колистин (10 мг/л) и налидиксовая кислота (15 мг/л). Эти антимикробные агенты делают среду селективной для грамположительных микроорганизмов: колистин и налидиксовая кислота разрушают клеточную мембрану грамотрицательных организмов, а налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК чувствительных грамотрицательных бактерий.

Использование растительных пептонов (HiVeg™) вместо животных исключает риски, связанные с БЭГ/ТГЭ (болезнь коровьего губчатого мозга / трансмиссивные губчатые энцефалопатии). Кукурузный крахмал выступает в роли нейтрализатора, а экстракт дрожжей служит источником энергии. При добавлении крови (овечьей или лошадиной) среда позволяет определять гемолитические реакции и обеспечивает X-фактор и V-фактор, необходимые для роста многих видов бактерий.

Область применения

Рекомендуется для селективного выделения грамположительных кокков, стафилококков и стрептококков, особенно в образцах, где присутствует избыток грамотрицательных бацилл. Также используется для селективного выделения Gardnerella vaginalis. Без добавления крови среда поддерживает рост Brucella abortus, Yersinia pestis, Clostridium perfringens и всех распространенных представителей семейства Enterobacteriaceae.

Типовые образцы:

• Пробы молочных продуктов.
• Пробы воды.

Методика приготовления и анализа

1. Растворить 44,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 5 % (v/v) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 7,10–7,50 (водный раствор 4,4 % при 25 °C: 7,3 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 5 % (v/v) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Ограничения и предостережения

1. Некоторые штаммы бета-гемолитических стрептококков могут образовывать зоны гемолиза на агаре Columbia CNA. Для дальнейшей идентификации таких штаммов рекомендуется пересев на кровяной агар (M073).
2. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
3. Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C (как для сухой, так и для приготовленной среды).
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.