HiMedia MV537-500G Основа HiVeg среды Лёффлера

Основа HiVeg среды Лёффлера HiMedia MV537-500G для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинических образцов и в чистых культурах. Применяется для выявления хромогенеза, протеолиза и продукции аскоспор; вес упаковки 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Лёффлера была разработана Ф. Лёффлером и впоследствии модифицирована Перри, Петраном и Баком. Основа HiVeg® Medium Base способствует первичной и вторичной изоляции и культивированию привередливых патогенных микроорганизмов, особенно из мазков из носа и горла. Среда восстанавливает вирулентность и другие идентифицирующие свойства (микроскопические и колониальные), которые могли быть утрачены вследствие длительной инкубации или повторного пересева.

В основе HiVeg® Medium Base лежит полная замена пептона животного происхождения растительными пептонами для исключения рисков заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Высокое содержание сыворотки помогает определить протеолитическую активность организмов, а также используется для демонстрации пигментации и аскоспор. Специальный пептон HiVeg® и экстракт HiVeg® обеспечивают необходимые питательные вещества для роста, а декстроза служит источником ферментируемых углеводов и энергии.

Для селективной изоляции Corynebacteria данную среду следует использовать параллельно с сыворочно-теллуритовым агаром.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 8,75 г основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Полностью растворите среду и стерилизуйте в автоклаве при температуре 115 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 20 минут.
3. Охладите до 50–55 °C и асептически добавьте 750 мл стерильной лошадиной сыворотки (RM1239).
4. Тщательно перемешайте и асептически разлейте по стерильным пробиркам.
5. Стерилизуйте среду методом инсписсации (уваривания) при 80–85 °C в течение 2 часов в потоке пара в течение как минимум 3 последовательных дней.

Посев и инкубация

• Проведите посев мазков непосредственно на поверхность среды. После инкубации приготовьте мазки с поверхности скоса.
• Тест на протеолиз: инокулируйте скос и до начала инкубации залейте скос срей Бруера-тиогликолятом HiVeg® (MV019). Инкубацию следует проводить в течение 3–4 дней или дольше до появления признаков протеолиза.

Технические характеристики

Физико-химические показатели

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • База: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
  • После добавления сыворотки лошади: беловатый непрозрачный раствор.
• Реакция (pH 3,52% водного раствора базы при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 750 мл сыворотки лошади после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Состав (г/л)

Область применения и ограничения

Типы образцов

Клинические образцы: мазки из носоглотки и зева.

Ограничения

1. Для оптимального выделения C. diphtheriae необходимо получение мазков из носоглотки и зева при сборе образца.
2. Для подтверждения результатов требуется проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения основы: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: все загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.