HiMedia MV537-500G Основа HiVeg среды Лёффлера

Основа питательной среды HiMedia MV537-500G Основа HiVeg среды Лёффлера — порошковая основа для приготовления среды с хранением при 10–30 °C. Применяется для культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинических образцов и чистых культур, при этом для подтверждения результата требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа HiVeg среды Лёффлера рекомендована для:

• культивирования Corynebacterium diphtheriae из клинических образцов и чистых культур;
• выявления пигментообразования;
• определения протеолиза;
• выявления аскоспор;
• первичного и вторичного выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, особенно из образцов из носа и зева;
• восстановления вирулентности и других идентификационных свойств микроорганизмов, включая микроскопические и колониальные признаки, утраченных вследствие длительной инкубации или многократных пересевов.

Основа предназначена для приготовления среды с добавлением стерильной конской сыворотки. Растительные пептоны полностью заменяют пептон животного происхождения, что исключает риски, связанные с BSE/TSE.

Принцип действия и интерпретация

Среда Лёффлера первоначально разработана Лёффлером и позднее модифицирована Perry и Petran, а также Buck.

Высокое содержание сыворотки способствует определению протеолитической активности микроорганизмов. Среда также используется для выявления пигментации и аскоспор.

• Специальный пептон HiVeg® и экстракт HiVeg® обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами.
• Декстроза (глюкоза) служит источником сбраживаемых углеводов и энергии.
• Для исследования мазки непосредственно втирают в поверхность среды, а после инкубации готовят мазки с поверхности скоса.
• Для определения протеолиза засевают скос и до инкубации заливают его тиогликолевой средой HiVeg® Brewer (MV019).
• Инкубацию проводят 3–4 дня или дольше — до появления признаков протеолиза.
• Для селективного выделения коринебактерий основу HiVeg среды Лёффлера следует использовать параллельно с агаром с теллуритом сыворотки.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 8,75 г основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов на квадратный дюйм (≈0,069 МПа) и температуре 115 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 50–55 °C.
5. Асептически добавьте 750 мл стерильной конской сыворотки RM1239.
6. Тщательно перемешайте.
7. Асептически разлейте среду в стерильные пробирки.
8. Стерилизуйте среду дробной стерилизацией при 80–85 °C в течение 2 ч в свободно текущем паре на протяжении не менее 3 последовательных дней.

Тип образца

Клинические образцы: мазки из носоглотки и зева.

Пробоотбор и обращение с образцами

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Для оптимального выделения C. diphtheriae при сборе образца необходимо получать мазки из носоглотки и зева.
2. Для подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основа: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-янтарного цвета.
• После добавления конской сыворотки: непрозрачный раствор от почти белого цвета.

Реакция

Реакция 3,52%-ного водного раствора основы при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления 750 мл конской сыворотки и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения основы: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия продукт необходимо хранить в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.