HiMedia MV511-500G Основа HiVeg агара Миддлбрук 7H11

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MV511-500G Основа HiVeg агара Миддлбрук 7H11 производства HiMedia предназначена для приготовления агара на растительной основе без компонентов животного происхождения. Применяется для выделения, культивирования и определения чувствительности микобактерий, включая Mycobacterium tuberculosis, с инкубацией при повышенном содержании CO₂ и в аэробных условиях.

Назначение

Основа HiVeg агара Миддлбрук 7H11 предназначена для выделения, культивирования и определения чувствительности микобактерий. Клинический тип образца: мокрота.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C, в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Принцип действия и интерпретация

Твёрдые среды для культивирования микобактерий могут иметь яичную основу, как среды Лёвенштейна—Йенсена, или агаровую основу, как среды Миддлбрука. Дюбос и Миддлбрук разработали различные составы с олеиновой кислотой и альбумином, которые защищают микобактерии от токсичных веществ и способствуют росту туберкулёзных бацилл.

Агар Миддлбрук 7H11 представляет собой модификацию агара Миддлбрук 7H10 и используется для выделения, культивирования и определения чувствительности M. tuberculosis. Добавление гидролизата HiVeg® усиливает рост более требовательных штаммов M. tuberculosis, что способствует проведению тестирования чувствительности к лекарственным препаратам.

Среда обогащается добавлением питательной добавки Миддлбрук OADC FD018 и глицерина:

• неорганические соли в составе среды Миддлбрука поддерживают рост микобактерий;
• лимонная кислота, образующаяся из цитрата натрия, способствует удержанию неорганических катионов в растворе;
• глицерин служит источником углерода и энергии;
• добавка Миддлбрук OADC FD018 содержит олеиновую кислоту, бычий альбумин, хлорид натрия, декстрозу и каталазу;
• олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий;
• некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий, однако альбумин связывает эти кислоты и предотвращает их токсическое действие;
• декстроза служит источником энергии;
• каталаза нейтрализует токсичные пероксиды;
• малахитовый зелёный частично подавляет рост других бактерий.

В основе Middlebrook 7H11 HiVeg® Agar Base пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами, что позволяет исключить риски, связанные с BSE/TSE.

Микобактерии являются строгими аэробами, поэтому при инкубации необходимо обеспечить аэробные условия и повышенное содержание CO₂. При обеззараживании образцов требуется соблюдать осторожность. Необходимо обеспечить правильный сбор материала: используется мокрота, а не слюна. Образцы следует обрабатывать с осторожностью во избежание загрязнения.

По сравнению с агаром Миддлбрук 7H10, агар Миддлбрук 7H11 является модифицированной формулой с добавлением гидролизата HiVeg®; продукт также отличается полной заменой пептонов животного происхождения на растительные.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 10,25 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 2,5 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона добавки для роста Middlebrook OADC FD018.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри или распределите требуемым способом.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления добавки для роста Middlebrook OADC FD018 и глицерина и инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с зеленоватым оттенком.
• Реакция: реакция 2,05%-ного водного раствора с добавлением 0,5 % глицерина при 25 °C.
• pH: 6,40–6,80.
• Конечный pH: 6,6 ± 0,2.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с образцами и культурами необходимо соблюдать правила микробиологической лабораторной практики. Следует применять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• Следуйте стандартным мерам предосторожности, установленным для работы с образцами.
• Руководства по безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Перед определением pH приготовленной среды необходимо выдержать среду в течение периода стабилизации. Если pH измерен сразу после приготовления и находится вне установленной спецификации, повторите измерение через некоторое время для получения конечного значения pH.
2. Для подтверждения результатов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

Храните сухой препарат при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить препарат в сухом виде, поскольку гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение может вызвать комкование продукта. Храните препарат в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие свойства продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.