HiMedia MV511-500G Основа HiVeg агара Миддлбрук 7H11

Основа HiVeg агара Миддлбрук 7H11 HiMedia MV511-500G для изоляции, культивирования и определения чувствительности микобактерий. Среда разработана на основе растительных пептонов для исключения рисков БЭПИ/ТСЭ (BSE/TSE), характерных для компонентов животного происхождения.

Принцип измерения

Агар Миддлбрук 7H11 представляет собой модификацию среды 7H10, предназначенную для выделения и культивирования M. tuberculosis. Среда содержит комплекс неорганических солей, способствующих росту микобактерий; цитрат натрия обеспечивает удержание неорганических катионов в растворе, а глицерин служит источником углерода и энергии.

Добавление растительного гидролизата HiVeg® улучшает рост более требовательных штаммов M. tuberculosis, что критически важно при тестировании на лекарственную чувствительность. Для полноценного функционирования среда обогащается добавкой Middlebrook OADC (содержит олеиновую кислоту, бычий альбумин, NaCl, декстрозу и каталазу). Олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий, при этом альбумин связывает токсичные свободные жирные кислоты, предотвращая их негативное воздействие. Каталаза нейтрализует токсичные перекиси, а малахитовый зеленый частично подавляет рост сопутствующей микрофлоры.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 10,25 г основы в 450 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 2,5 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один флакон добавки Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри или другие подходящие емкости.

Требования к образцам и инкубация

• Тип образца: клинический материал (мокрота; следует избегать попадания слюны).
• Условия инкубации: микобактерии являются строгими аэробами, поэтому при инкубации необходимо обеспечить аэробные условия и повышенное парциальное давление CO₂.
• Срок инкубации: от 2 до 4 недель при температуре 35–37 °C.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до светло-зеленого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с зеленоватым оттенком.
• Реакция: pH 6,40–6,80 (для 2,05 % водного раствора с 0,5 % глицерина при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018) и глицерина после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Область применения и ограничения

Среда применяется в микробиологических лабораториях для выделения и тестирования чувствительности микобактерий.

Ограничения:

• Требуется период стабилизации перед проверкой pH готовой среды. Если pH сразу после приготовления выходит за пределы спецификации, необходимо провести повторный замер через некоторое время.
• Для окончательного подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Все контаминированные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.