HiMedia MV510A-100G Основа HiVeg агара с канамицином, эскулином и азидом

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV510A-100G Основа HiVeg агара с канамицином, эскулином и азидом производства HiMedia предназначена для выделения энтерококков из пищевых продуктов. Основа содержит селективные компоненты — сульфат канамицина и азид натрия — и индикаторную систему эскулин–цитрат аммония железа для выявления гидролиза эскулина по почернению среды.

Назначение

Основа Kanamycin Esculin Azide HiVeg® Agar/Broth применяется для выделения Enterococci из пищевых продуктов. Среда используется, в том числе, в методике с иммерсионными пластинами для бактериологического мониторинга пищевых продуктов.

Продукт MV510A представляет собой агаровую основу; родственная среда MV776A применяется как бульонная основа.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среды Kanamycin Esculin Azide HiVeg® получают заменой ферментативного гидролизата казеина на гидролизат HiVeg®. Гидролизат HiVeg® не содержит рисков, связанных с BSE/TSE.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают Enterococci необходимыми питательными веществами. Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами. Эскулин и цитрат аммония железа образуют индикаторную систему: гидролизирующие эскулин Enterococci вызывают почернение среды и формирование чёрных зон вокруг колоний.

Среда представляет собой модификацию Kanamycin Esculin Azide Media, составленной по методике Mossel и соавторов, для выявления Enterococci в пищевых продуктах.

Технические характеристики

Профиль продукта

• Рекомендуемое применение: выделение Enterococci из пищевых продуктов
• Рабочая концентрация при восстановлении MV510A: 42,64 г/л
• Рабочая концентрация при восстановлении MV776A: 32,64 г/л
• Объём приготовленной среды из упаковки 100 г MV510A: 2,34 л
• Объём приготовленной среды из упаковки 100 г MV776A: 3,06 л
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Селективная добавка: Kanamycin Sulphate Selective Supplement (FD146)
• Стерилизация: 121 °C, 15 мин
• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Назначение изделия: основа
• Масса: 100 г
• Температура: 10–30 °C

Состав

Конечный pH водного раствора при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 21,32 г MV510A или 16,32 г MV776A и суспендируйте в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Kanamycin Sulphate Selective Supplement (FD146).
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри или пробирки.

Предупреждение по обращению с азидом натрия

Азид натрия может образовывать взрывоопасные металлические азиды при контакте с материалами канализационной и водопроводной арматуры. Для удаления одноразовых материалов необходимо использовать достаточное количество воды для промывки.

Методика выделения энтерококков из пищевых продуктов

1. Добавьте 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого продукта в предварительно охлаждённый разбавитель — триптонную воду HiVeg® MV463.
2. Приготовьте десятичные разведения.
3. Инокулируйте полученные десятичные разведения в бульонную основу Kanamycin Esculin Azide HiVeg® Broth Base (MV776A).
4. Инкубируйте при 35 °C в течение 16–24 ч.
5. При почернении среды выполните пересев штриховым методом на агаровую основу MV510A.
6. После инкубации проведите подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Светло-жёлтый порошок, допускается слегка зеленоватый оттенок; порошок однородный, сыпучий, без комков.

Гелеобразование

Образуется прочный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем MV510A.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета — от прозрачного до слегка опалесцирующего; в пробирках формируется прозрачный раствор.

Реакция среды

Реакция водного раствора M510A с концентрацией 4,26 % масс./объём или M776A с концентрацией 3,27 % масс./объём: pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35 °C или 42 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• * — с добавлением Kanamycin Sulphate Selective Supplement (FD146).
• + — почернение среды или образование чёрной зоны вокруг колонии.
• − — отсутствие почернения среды или чёрной зоны вокруг колонии.

Комплект поставки

• Основа HiVeg агара с канамицином, эскулином и азидом MV510A — 100 г.

Сравнительное отличие

В составе MV510A/MV776A ферментативный гидролизат казеина заменён гидролизатом HiVeg® растительного происхождения; MV510A содержит агар в концентрации 10,00 г/л, тогда как MV776A является бульонной основой и агара не содержит.