HiMedia MV510A-100G Основа HiVeg агара с канамицином, эскулином и азидом

Основа HiVeg агара с канамицином, эскулином и азидом HiMedia MV510A-100G на растительной основе. Применяется для изоляции энтерококков (Enterococci) в пищевых продуктах; pH среды составляет 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Принцип измерения и интерпретация

Среды разработаны путем замены казеинового ферментного гидролизата на гидролизат HiVeg®, что исключает риски заражения губчатой энцефалопатией (BSE/TSE). Состав является модификацией среды Kanamycin Esculin Azide, разработанной по методике Mossel et al. для выявления энтерококков в пищевых продуктах; также используется в технике дип-слайдов для бактериологического мониторинга.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества для роста Enterococci. Селективность и подавление сопутствующей микрофлоры осуществляются с помощью сульфата канамицина и азида натрия. Эскулин и цитрат аммония-железа(III) образуют индикаторную систему: эскулин-гидролизующие энтерококки вызывают образование черных зон вокруг колоний.

Методика проведения анализа

1. Подготовка проб: 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого продукта добавляют в предварительно охлажденный разбавитель (триптон-вода HiVeg® MV463) и готовят десятикратные разведения.
2. Первичный посев: Десятикратные разведения инокулируют в бульон на основе Kanamycin Esculin Azide HiVeg® (MV776A) и инкубируют при 35 °C в течение 16–24 часов.
3. Подтверждение: При появлении почернения среды проводят посев штрихом на агар (MV510A), после чего выполняют подтверждающие тесты.

Инструкция по приготовлению среды

1. Суспендируйте 21,32 г основы MV510A (или 16,32 г основы MV776A) в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое одной восстановленной ампулы селективной добавки сульфата канамицина (FD146).
5. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри или пробирки.

Предупреждение: Азид натрия может образовывать взрывоопасные азиды металлов при контакте с материалами водопроводных труб. Рекомендуется использовать достаточное количество воды для промывки стоков.

Технические характеристики

Общие параметры

• Происхождение: без компонентов животного происхождения (растительная основа)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г
• pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут

Сравнение основ (растительная vs животная)

Рецептура и приготовление

Состав (г/л)

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Порошок: светло-жёлтый, может иметь слегка зеленоватый оттенок; гомогенный, сыпучий.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0% агаром (для MV510A).
• Цвет и прозрачность: янтарный цвет; в чашках Петри гель от прозрачного до слегка опалесцирующего, в пробирках — прозрачный раствор.
• Реакция: водный раствор 4,26 % (м/об) для M510A или 3,27 % (м/об) для M776A имеет pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35 °C или 42 °C в течение 18–24 часов.

Условные обозначения:

• * = с добавлением селективной добавки сульфата канамицина (FD146).
• • = почернение среды / чёрная зона вокруг колонии.
• − = отсутствие почернения среды / чёрной зоны вокруг колонии.

Условия эксплуатации и хранения

• Сухая среда: хранить при температуре ниже 30 °C.
• Готовая среда: хранить при температуре 2–8 °C.
• Температура хранения (общая): 10–30 °C.

Совместимость и дополнения

Для обеспечения селективности среды требуется использование следующей добавки:

• Селективная добавка сульфата канамицина (Kanamycin Sulphate Selective Supplement FD146).