HiMedia MV510-100G HiVeg агар с канамицином, эскулином и азидом

Питательная агаризованная среда HiMedia MV510-100G HiVeg агар с канамицином, эскулином и азидом предназначена для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда применяется для анализа пищевых и молочных образцов, при этом дальнейшая идентификация изолятов требует биохимических и серологических тестов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов, включая молочные образцы.

Тип образцов

• Пищевые образцы
• Молочные образцы

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Фекальные стрептококки, несущие антигены группы D по классификации Лансфилда, относят к энтерококкам. Стрептококки группы D, входящие в состав фекальной микрофлоры, могут загрязнять различные пищевые продукты, особенно продукты животного происхождения.

Среда с канамицином, эскулином и азидом разработана по методике Mossel и соавторов для выявления энтерококков в пищевых продуктах. Среда также применялась в методе погружных пластин для бактериологического мониторинга пищевых продуктов.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают энтерококки необходимыми питательными веществами. Сульфат канамицина и азид натрия являются селективными ингибирующими компонентами. Эскулин и цитрат аммония и железа образуют индикаторную систему для выявления стрептококков, гидролизующих эскулин.

При гидролизе эскулина образуются продукты, взаимодействующие с ионами железа и формирующие чёрные железо-фенольные соединения. В результате вокруг колоний, гидролизующих эскулин, появляются чёрные зоны и происходит почернение среды.

В составе среды животный пептон полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Среда применялась для выделения энтерококков, устойчивых к гликопептидам, из клинических образцов и пищевых продуктов.

Универсальной питательной среды, позволяющей выделять все штаммы энтерококков, не существует. Если ориентировочного подсчёта недостаточно, идентичность всех выделенных культур необходимо подтверждать дополнительными тестами.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 44,67 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Методика анализа пищевых и молочных образцов

1. Смешайте 1 г или 1 мл пищевого образца с 9 мл предварительно охлаждённого разбавителя — бульона с триптоном HiVeg® MV463.
2. Приготовьте десятичные разведения образца.
3. Внесите десятичные разведения в бульон с канамицином, эскулином и азидом HiVeg®.
4. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 16–24 ч.
5. При появлении почернения среды выполните высев штрихом на агаризованную среду.
6. После инкубации проведите подтверждающие тесты.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV510-100G
• Назначение изделия: агаризованная питательная среда
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип упаковки: HDPE
• Концентрация при приготовлении: 44,67 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета с зеленоватым оттенком, без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с фиолетовым оттенком.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,47 % при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов используйте подходящие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными методиками. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия хранения и срок годности

• Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранить приготовленную среду при температуре 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

• Для окончательной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.
• Универсальная среда для выделения всех штаммов энтерококков отсутствует.
• Результаты применения среды оцениваются при соблюдении инструкции на этикетке и использовании продукта в пределах срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открыванием прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные лабораторными процедурами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Сравнительное техническое отличие

В среде HiVeg® животные пептоны полностью заменены