HiMedia MV501-500G Основа декарбоксилазного HiVeg агара

Основа декарбоксилазного HiVeg агара HiMedia MV501-500G — растительная питательная среда для дифференциации бактерий на основе их способности декарбоксилировать добавленные аминокислоты. Применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и других грамотрицательных бацилл; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда разработана по методу Мёллера для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. В состав входит бромкрезоловый пурпурный — индикатор pH, который меняет цвет с пурпурного на жёлтый в кислой среде.

Декарбоксилазная активность стимулируется кислым pH, в результате чего аминокислоты декарбоксилируются или расщепляются с образованием соответствующих аминов. Образование аминов повышает pH среды, что приводит к изменению цвета индикатора с жёлтого на пурпурно-фиолетовый.

Для обеспечения достоверности результатов каждый изолят должен быть инокулирован в пробирку с базовой средой без добавления аминокислоты; если такая проба становится щелочной, тест считается недостоверным.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Добавьте 5 г соответствующей L-аминокислоты в форме гидрохлорида (L-лизин, L-аргинин или L-орнитин) на литр среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Разлейте по стерильным пробиркам и охладите в наклонном положении для формирования скоса. Примечание: при использовании гидрохлорида L-орнинина требуется повторная корректировка pH.

Особенности проведения анализа

Для предотвращения защелачивания среды из-за воздействия воздуха рекомендуется покрывать инокулированные пробирки слоем стерильного минерального масла.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный цвет, прозрачный гель (в пробирках со скосом).
• Реакция: pH 6,30–6,70 (водный раствор 2,4 % мас./об. при 25 °C: 6,5 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации необходимо проводить дополнительные биохимические и серологические тесты.
• Воздействие воздуха может вызвать защелачивание среды.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица).
• Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.