HiMedia MV501-500G Основа декарбоксилазного HiVeg агара

Питательная среда HiMedia MV501-500G Основа декарбоксилазного HiVeg®™ агара производства HiMedia в виде порошка предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Основа используется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и других грамотрицательных палочек; рабочий диапазон хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа декарбоксилазного HiVeg®™ агара рекомендована для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать добавленную в питательную среду аминокислоту.

Среда применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и других грамотрицательных палочек. Для окончательной идентификации необходимо выполнять дополнительные биохимические и серологические тесты.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Основа декарбоксилазного агара разработана по методу Moeller для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Декарбоксилазный HiVeg®™ агар получают полной заменой пептона животного происхождения на растительные пептоны, чтобы исключить риски, связанные с BSE/TSE.

Пептон HiVeg®™ и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми питательными веществами, необходимыми для роста бактерий. Декстроза является ферментируемым углеводом. Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH: в кислой среде его окраска изменяется с пурпурной на жёлтую.

Декарбоксилазная активность стимулируется кислым pH. В результате аминокислоты декарбоксилируются или разрушаются с образованием соответствующих аминов. Образование аминов повышает pH среды, изменяя окраску индикатора и цвет среды с жёлтого на пурпурно-фиолетовый.

Получение орнитиндекарбоксилазы особенно полезно для дифференциации видов Enterobacter и Klebsiella: первые продуцируют этот фермент и являются подвижными, тогда как вторые неподвижны и не синтезируют данный фермент.

Каждый изолят необходимо инокулировать в пробирку с основной средой без аминокислоты. Если среда в этой пробирке становится щелочной, результат теста недействителен. Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание среды, поэтому для получения оптимальных результатов инокулированные пробирки рекомендуется покрывать слоем стерильного минерального масла.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 24,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Добавьте 5 г выбранной L-аминокислоты в форме гидрохлорида на каждый литр среды: L-лизина, L-аргинина или L-орнитина.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление 15 фунтов соответствует примерно 0,10 МПа.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.
8. При использовании гидрохлорида L-орнитина повторно отрегулируйте pH.

Тип образца

Тип образца: образцы.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и нанесением сверху слоя стерильного минерального масла.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.
• # — ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.
• ^ — ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Контроль качества

• Внешний вид: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный гель пурпурного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,4 % м/о при 25 °C; pH 6,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,30–6,70.

Ограничения применения

• Для дальнейшей идентификации необходимо проводить дополнительные биохимические и серологические тесты.
• Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание среды; для получения оптимальных результатов инокулированные пробирки следует покрывать слоем стерильного минерального масла.

Обращение с образцами и меры предосторожности

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами. Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Контейнер: плотно закрытый.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов, а также материалов, контактировавших с клиническими образцами, соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры: материалы должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техничес