HiMedia MV493-500G HiVeg агар с желчью, эскулином и азидом

Селективная питательная среда HiMedia MV493-500G HiVeg агар с желчью, эскулином и азидом для изоляции и предварительной идентификации фекальных стрептококков. Применяется для анализа образцов пищевых продуктов и воды; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию агара с желчью и эскулином. В данной версии концентрация синтетического детергента снижена, и добавлен азид натрия для подавления роста большинства сопутствующих бактерий.

Основой метода является способность энтерококков и стрептококков группы D гидролизовать эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа (III), образуя темно-коричневый или черный комплекс, который визуализируется как зона черного осадка вокруг колоний.

Для исключения рисков возникновения БЭС/ТЗС (губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота / трансмиссивной спонгиформной энцефалопатии), в составе HiVeg® полностью заменены пептоны животного происхождения на растительные.

Область применения

• Пищевые продукты: селективный выделение и идентификация фекальных стрептококков (энтерококков).
• Вода: подтверждение кишечных энтерококков после фильтрации проб через мембранные фильтры и предварительного посева на среду Сланец-Бартели (M612I).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 56,65 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед разливом.

Процедура анализа

Вариант 1: Прямой посев

• Инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Вариант 2: Анализ проб воды (метод мембранной фильтрации)

1. Пробы воды фильтруют через мембранные фильтры, которые асептически помещают на среду Сланец-Бартели (M612I).
2. Красные или бордовые колонии, обнаруженные после инкубации, подтверждают, перенося мембранный фильтр на чашку с агаром HiVeg с желчью, эскулином и азидом, предварительно нагретым до 44 °C.
3. Инкубируют при 44 $\pm$ 0,5 °C в течение 2 часов.
4. Все типичные колонии с коричнево-черным окрашиванием окружающей среды подсчитывают как кишечные энтерококки.

Интерпретация результатов

• Положительная реакция: появление зоны черного осадка вокруг колоний. При использовании среды в виде скоса (в пробирках) — почернение более половины скоса в течение 24–48 часов.
• Отрицательная реакция: полное отсутствие почернения или почернение менее половины скоса в течение 24–48 часов.
• Примечание: стрептококки группы Viridans иногда дают слабую положительную реакцию. Положительный тест также могут давать виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком (в чашках Петри).
• pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.

Ограничения и предостережения

• Из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Для окончательного подтверждения идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе со средой использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) в соответствии с правилами микробиологических лабораторий.
• Загрязненные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.