HiMedia MV482-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу

Сухая питательная среда HiMedia MV482-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу на растительной основе. Применяется для обнаружения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, в частности для идентификации патогенных Staphylococci.

Принцип измерения

Среда предназначена для выявления способности микроорганизмов вырабатывать фермент дезоксирибонуклеазу (ДНКазу), которая деполимеризует ДНК. Это приводит к образованию зоны просветления вокруг роста микроорганизмов, которую можно визуализировать путём заливки пластины 1N раствором соляной кислоты (HCl).

При добавлении в среду толуидинового синего (Toluidine blue) благодаря его метахроматическим свойствам активность ДНКазы проявляется в виде ярко-розовых зон вокруг колоний. Данная модификация позволяет дифференцировать непигментированные виды Serratia, выделенные из клинических источников, от видов Enterobacter и Klebsiella.

Использование гидролизата HiVeg® исключает риски, связанные с БЭП/ТСЭ (губчатой энцефалопатией), которые характерны для сред на основе казеинового гидролизата животного происхождения.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: 42 г порошка суспендировать в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Растворение: Нагревать до кипения при постоянном перемешивании до полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: Автоклавировать при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Разлив: Охладить до 45 °C и разлить в стерильные чашки Петри.
5. Добавление индикатора: Содержимое одного флакона толуидинового синего (FD051) добавляют либо в среду перед стерилизацией, либо заливают пластины 0,1 % раствором толуидинового синего после инкубации.
6. Инкубация: Инкубировать посевы при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

• При заливке пластины 1N HCl:
  • Положительная реакция (+): образование прозрачной зоны вокруг роста.
  • Отрицательная реакция (−): отсутствие зоны просветления.
• При использовании толуидинового синего:
  • Положительная реакция (+): появление розовой или красной зоны вокруг роста.
  • Отрицательная реакция (−): отсутствие изменения цвета.

Примечание: некоторые штаммы Staphylococcus могут подавляться толуидиновым синим; в таких случаях требуются дополнительные подтверждающие тесты.

Технические характеристики

Основные параметры

• Реконституция: 42,0 г/л
• Выход готовой среды из 100 г порошка: 2,38 л
• Значение pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Добавка: толуидиновый синий (FD051)
• Температура хранения (сухая среда): ниже 30 °C
• Температура хранения (готовая среда): 2–8 °C

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный, свободно текущий порошок светло-жёлтого цвета, может иметь зеленоватый оттенок.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель. При добавлении толуидинового синего — синий, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: 4,2 % (масса/объём) водный раствор имеет pH 7,3 $\pm$ 0,2 при 25 °C.

Спецификации материалов

Состав

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Сравнительный контекст

В отличие от стандартного агара для теста на ДНКазу (код M482), данная модификация (MV482) использует растительный гидролизат HiVeg® вместо казеинового гидролизата животного происхождения, что исключает риск контаминации прионами (БЭП/ТСЭ).