HiMedia MV482-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу

Основа питательной среды HiMedia MV482-500G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу с растительной основой без компонентов животного происхождения. Применяется для выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов, особенно патогенных Staphylococci, при этом толуидиновый синий может ингибировать некоторые штаммы стафилококков.

Назначение и область применения

Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу предназначена для обнаружения активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов, в особенности для идентификации патогенных Staphylococci.

Среда с добавлением толуидинового синего применяется для дифференциации и идентификации непигментированных видов Serratia, выделенных из клинического материала и способных быть ошибочно идентифицированных как представители родов Enterobacter и Klebsiella.

Профиль продукта

Продукт MV482 изготовлен на основе гидролизата HiVeg® растительного происхождения и не содержит компонентов животного происхождения.

Состав

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа агара для теста на ДНКазу HiVeg® представляет собой модификацию агара для теста на ДНКазу. Гидролизат HiVeg® используется вместо ферментативного гидролизата казеина животного происхождения для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатией.

Активность дезоксирибонуклеазы проявляется в деполимеризации ДНК. В результате вокруг зоны микробного роста образуется прозрачная зона, которую выявляют заливкой поверхности чашки 1 Н соляной кислотой.

При добавлении толуидинового синего непосредственно в среду активность ДНКазы приводит к появлению ярко-розовых зон вокруг роста вследствие метахроматических свойств толуидинового синего.

Гидролизат HiVeg® и папаиновый перевар соевой муки обеспечивают среду необходимыми питательными веществами.

Активность ДНКазы наблюдалась у Micrococci и коррелировала с коагулазной активностью: коагулазоположительные виды были ДНКазоположительными. Добавление ДНК и хлорида кальция активирует фермент дезоксирибонуклеазу. Модификация среды с добавлением толуидинового синего ускоряет идентификацию Serratia marcescens и позволяет дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Некоторые штаммы Staphylococci могут подавляться на агаре для теста на ДНКазу из-за присутствия толуидинового синего. Для окончательной идентификации необходимо выполнить дополнительные подтверждающие тесты.

Интерпретация при использовании соляной кислоты

• Положительная реакция (+): прозрачная зона вокруг роста.
• Отрицательная реакция (−): просветление вокруг роста отсутствует.

Интерпретация при использовании толуидинового синего

• Положительная реакция (+): розовая или красная зона вокруг роста.
• Отрицательная реакция (−): изменение окраски вокруг роста отсутствует.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.

2. Нагревайте до кипения при частом перемешивании до полного растворения среды.

3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

4. Охладите среду до 45 °C.

5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

6. Перед стерилизацией среды добавьте регидратированное содержимое одного флакона толуидинового синего FD051.

   Вместо добавления толуидинового синего перед стерилизацией можно после инкубации залить чашки 0,1%-ным раствором толуидинового синего FD051.

Технические характеристики

Параметры приготовления и хранения

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок светло-жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий. При добавлении толуидинового синего FD051 образуется гель синего цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 4,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Особенности применения

При заливке поверхности чашки 1 Н соляной кислотой активность ДНКазы оценивают по появлению прозрачной зоны вокруг роста.

При добавлении толуидинового синего в среду активность ДНКазы оценивают по появлению розовой или красной зоны вокруг роста. Некоторые штаммы стафилококков могут быть ингибированы толуидиновым синим, поэтому результат следует подтверждать дополнительными тестами идентификации.