HiMedia MV482-100G Основа HiVeg агара для теста на ДНКазу

Основа сухой питательной среды HiMedia MV482-100G HiVeg агар для теста на ДНКазу на растительной основе. Применяется для выявления дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, в частности для идентификации патогенных Staphylococci.

Принцип измерения

Среда предназначена для определения способности микроорганизмов вырабатывать фермент ДНКазу, который деполимеризует ДНК. Это приводит к образованию прозрачной зоны вокруг колоний роста, которую визуализируют путём заливки чашки 1N раствором соляной кислоты (HCl).

При добавлении в среду толуидинового синего (Toluidine blue) ДНКазная активность проявляется в виде ярко-розовых зон вокруг роста благодаря метахроматическим свойствам красителя. Данная модификация позволяет дифференцировать непигментированные виды Serratia, выделенные из клинических источников, от видов Enterobacter и Klebsiella.

Использование гидролизата HiVeg® исключает риски, связанные с БЭС/ТСЭ (губчатой энцефалопатией), которые характерны для сред на основе казеинового гидролизата животного происхождения.

Методика приготовления и использования

1. Растворить 42 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения при постоянном перемешивании до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45 °C и разлить по стерильным чашкам Петри.
5. Варианты добавления индикатора:
   • Добавить содержимое одного флакона толуидинового синего (FD051) непосредственно перед стерилизацией среды.
   • Либо залить чашки 0,1% раствором толуидинового синего (FD051) после инкубации образцов.

Технические характеристики

Общие параметры

• Вес: 100 г
• Концентрация при приготовлении: 42,0 г/л
• Объем готовой среды из 100 г: 2,38 л
• Значение pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Хранение: сухая среда — при температуре ниже 30 °C; готовая среда — от +2 до +8 °C.

Состав (г/л)

Сравнение типов основы

Дополнительные спецификации

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок светло-жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель. При добавлении толуидинового синего (FD051) гель становится синим, прозрачным или слегка опалесцирующим.
• Реакция: водный раствор (4,2% масс/об) имеет pH 7,3 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов:

• При заливке чашки 1N HCl: «+» — прозрачная зона вокруг роста; «-» — отсутствие просветления.
• При использовании среды с толуидиновым синим: «+» — розово-красная зона вокруг роста; «-» — отсутствие изменения цвета.

Примечание: некоторые штаммы Staphylococcus могут подавляться толуидиновым синим, в таких случаях требуются дополнительные подтверждающие тесты.

Совместимость и дополнения

• Добавка: толуидиновый синий (Toluidine blue) FD051.